[發明專利]檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的探針和方法有效
| 申請號: | 201410262409.0 | 申請日: | 2014-06-12 |
| 公開(公告)號: | CN104017878A | 公開(公告)日: | 2014-09-03 |
| 發明(設計)人: | 張昕;張麗;李凡 | 申請(專利權)人: | 山西大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) 14105 | 代理人: | 張福增 |
| 地址: | 030006 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 哮喘 基因 adrb2 突變 探針 方法 | ||
1.檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的專用探針,特征在于,其是核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.4和SEQ?ID?NO.5所示DNA片段的混合物,或者是核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.4和SEQ?ID?NO.5所示序列的反向互補序列的DNA片段的混合物。
2.檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的基因芯片,其特征在于,含有權利要求1所述的專用探針。
3.檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的裝置,其特征在于,包括如權利要求1所述的專用探針或者如權利要求2所述的DNA芯片。
4.如權利要求3所述的裝置,其特征在于,所述的裝置還包括引物對,所述的引物對中,一條引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ?ID?NO.2,另一條引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ?ID?NO.3。
5.如權利要求4所述的裝置,其特征在于,所述的引物上含有熒光標記。
6.檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的引物,其特征在于,其是核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.2或SEQ?ID?NO.3所示的DNA片段。
7.如權利要求6所述的引物,其特征在于,所述的引物上含有熒光標記。
8.一種檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)制備待測樣本的總DNA,作為模板,用含檢測標記的引物對進行PCR擴增,獲得PCR產物,所述的引物對中,一條引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ?ID?NO.2,另一條引物的核苷酸序列如序列表中的SEQ?ID?NO.3所示;
(2)將專用探針結合于基因芯片的片基上,洗去未結合的探針,獲得檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的基因芯片,所述的專用探針是核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.4和SEQ?ID?NO.5所示的DNA片段的混合物,或者是核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.4和SEQ?ID?NO.5所示序列的反向互補序列的DNA片段的混合物;
(3)在步驟(2)所得的檢測哮喘易感基因ADRB2突變位點的基因芯片中加入步驟(1)所得的PCR產物,進行雜交,洗去未雜交的PCR產物;
(4)對步驟(3)所得的雜交后的基因芯片進行檢測。
9.如權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(2)所述的基因芯片的片基是醛基片基,所述的探針是氨基化探針。
10.如權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(2)所述的基因芯片的另外的加樣孔中加入β-action管家基因檢測探針,所述的β-action管家基因檢測探針的序列如序列表中SEQ?ID?NO.9所示序列的核苷酸片段。
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