[發明專利]一種同時定量測定天麻中多種酚類成分含量的方法

在審

• 申請號: 201410252945.2
• 申請日: 2014-06-09
• 公開（公告）號: CN105277642A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發明（設計）人: 肖紅斌;唐春蘭;王莉
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

1.一種同時定量測定天麻中多種酚類成分含量的方法，其特征在于：主要包括以下三個步驟，

1)對照標準品及供試待測品溶液的制備：將天麻酚類對照標準品及待測天麻提取物分別溶于體積濃度為0-8％的甲醇或乙腈的水溶液中，制備對照標準品混合溶液和待測供試品溶液；

2)以高效液相色譜-熒光檢測方法為手段分別進行對照標準品混合溶液和待測供試品溶液成分的定量分析；

通過對一系列不同質量濃度的天麻酚類化合物的對照標準品混合溶液進行分析，獲得對照標準品混合溶液中各天麻酚類化合物的保留時間及各天麻酚類化合物不同質量濃度對應的峰面積；

通過對待測供試品溶液的分析，獲得待測天麻提取物中天麻酚類化合物的保留時間及對應的峰面積；

3)外標法測定天麻中酚類成分的含量；

通過對一系列不同質量濃度的天麻酚類化合物的對照標準品混合溶液進行分析，以天麻酚類化合物的已知質量濃度和對應的峰面積作為橫縱坐標，建立各個已知天麻酚類化合物標準曲線；

以對照標準品混合溶液中各天麻酚類化合物的保留時間為基準，對待測天麻提取物中天麻酚類化合物進行定性，將定性后的待測天麻提取物中天麻酚類化合物的峰面積代入其對應天麻酚類化合物標準曲線中，對其進行定量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1)中天麻酚類對照標準品包括天麻素、對羥基苯甲醇、對羥基苯甲醛、parishinE、parishinG、parishinB、parishinC和parishin中的二種或三種以上，對照標準品混合溶液中各物質的質量濃度為5-2500ng/ml。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：步驟1)中天麻酚類成分主要包括天麻素、對羥基苯甲醇、parishinB、parishinC和parishin中的二種或三種以上。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟1)中以8％甲醇-水為溶劑制備天麻素、對羥基苯甲醇、parishinB、parishinC和parishin對照品混合溶液和制備天麻提取物供試品溶液。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：一系列不同質量濃度是指對照標準品溶液中天麻酚類化合物在質量濃度5-2500ng/ml之間選取5個以上、濃度間隔至少一倍的濃度值。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

步驟2)中：色譜條件為：C18液相色譜柱；流動相為甲醇或乙腈(A)-體積分數0.1～0.5％酸水溶液(B)；梯度程序洗脫；柱溫：40～60℃；流速：0.25～0.35ml/min；激發波長215nm～235nm，發射波長295～335nm；進樣量1～20μl。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于：

步驟2)中流動相為甲醇-酸水溶液，酸優選甲酸，其體積分數為0.5％；

步驟2)中柱溫為50℃，流速為0.35ml/min，進樣量為1μl；

步驟2)中激發波長為225nm，發射波長為310nm。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：待測供試品溶液中天麻提取物的質量濃度0.01-2mg/ml。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：天麻提取物為天麻的水提物、天麻的乙醇提取物或天麻的乙醇水提取物。