[發明專利]馬里苷在防治丙酮醛引起的認知功能障礙中的應用

無效

• 申請號: 201410245310.X
• 申請日: 2014-06-05
• 公開（公告）號: CN103989691A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 姜保平;許利嘉;肖培根;胡克平;彭勇
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥用植物研究所
• 主分類號: A61K31/7034
• 分類號: A61K31/7034;A61P25/28
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 楊厚;王為

技術領域：

本發明涉及馬里苷在保護PC12細胞免于丙酮醛損傷，尤其是在丙酮醛引起的認知功能障礙防治中的應用。

背景技術：

丙酮醛是一種羰基醛，在機體中丙酮醛是一些代謝途徑的副產物。它的形成可能來自于蘇氨酸分解代謝的中間體3-氨基丙酮或者脂質過氧化。而最重要的來源是糖酵解。丙酮醛來自糖酵解中間產物3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮的去磷酸化，而這種去磷酸化是非磷酸酶依賴性的。由于丙酮醛具有高反應性,其糖基化活性比葡萄糖高10000-50000倍,可定向修飾蛋白質的精氨酸殘基并與蛋白質不可逆地結合,形成糖化蛋白(glycationprotein)而產生細胞毒性，因此體內發展了多種解毒機制，其中一種就是乙二醛酶系統。丙酮醛(MG)大都會被機體內普遍存在的乙二醛酶系統所分解代謝,而這種乙二醛酶系統主要是由特定的乙二醛酶Ⅰ和乙二醛酶Ⅱ這兩種酶構成,通過使用一定量具有催化作用的還原型谷胱甘肽(GSH)進一步轉化成D-乳酸來達到上述分解代謝的作用。Glo-1可及時清除MG等α-羰基醛,,降低活性氧和二羰基糖化蛋白質組標志物的生成,以及降低氧化應激的標志物。

丙酮醛會在糖尿病人體內大量積累，進而誘發糖尿病并發癥，在腦中即表現為糖尿病腦病。糖尿病腦病(diabetic?encephalopathy,DE)是指糖尿病(diabetes?mellitus,DM)久病患者漸進發生的以智能減退和大腦神經生理及結構改變為主要特征的精神功能紊亂性疾病。2006年,專門術語糖尿病認知功能障礙(diabetes-associated?cognitive?decline,DACD)的提出，進一步增強了人們對這種功能紊亂的認識,并成為糖尿病腦病研究的焦點。廣泛的流行病學調查及其前瞻性研究表明，糖尿病是與年齡相關的認知功能下降和癡呆的一個危險因素,相對于非糖尿病患者,認知功能下降的速度在糖尿病患者中增加了1.5-2.0倍。而且研究顯示，在阿爾茨海默病(AIzheimers?disease,AD)腦脊髓中含有高濃度的丙酮醛(Vander?Jagt&Hunsaker,2003)，表明丙酮醛可能是AD的誘發因子之一。因此丙酮醛誘導的細胞凋亡在各種神經認知功能障礙疾病中起著至關重要的作用[Beisswenger?PJ,Drummond?KS,Nelson?RG,Howell?SK,Szwergold?BS,Mauer?M(2005),Susceptibility?to?diabetic?nephropathy?is?related?to?dicarbonyl?and?oxidative?stress.Diabetes54:3274–3281]；[Berlanga?J,Cibrian?D,Guillen?I,Freyre?F,Alba?JS,Lopez-Saura?P,Merino?N,Aldama?A,Quintela?AM,Triana?ME,Montequin?JF,Ajamieh?H,Urquiza?D,Ahmed?N,Thornalley?PJ(2005),Methylglyoxal?administration?induces?diabetes-like?microvascular?changes?and?perturbs?the?healing?process?of?cutaneous?wounds.Clin?Sci(Lond)109:83–95]。丙酮醛通常用于PC12細胞,作為糖尿病引起的認知能力下降的細胞模型。

馬里苷(marein)是一種查爾酮4’位的O-糖苷，也是一種多酚類化合物,分子式為C₂₁H₂₂O₁₁,相對分子量為450.392780g/mol。馬里苷存在于菊科植物兩色金雞菊(Coreopsis?tinctoria?Nutt.)的頭狀花序中(是兩色金雞菊的主要活性成分之一)。現代藥理學研究顯示，兩色金雞菊具有抗氧化、降血糖、降血壓、降血脂等作用。馬里苷的藥理活性國內外鮮有報道。迄今為止，現有技術中尚未見有馬里苷保護PC12細胞免受丙酮醛損傷作用的相關報道。

發明內容：

本發明的目的在于研究提供馬里苷新的藥理作用,即馬里苷對神經認知功能障礙如糖尿病腦病、阿爾茨海默病等的防治作用及其可能的作用機制。

本發明的主要技術方案包括：

1、四噻唑藍(MTT)法測定丙酮醛對PC12細胞存活率的影響；

2、MTT法測定馬里苷對丙酮醛刺激PC12細胞的保護作用；

3、Hochest33342染色檢測馬里苷對丙酮醛誘導增殖細胞凋亡的影響；