[發明專利]一種介孔材料表面蛋白質環冠的選擇性酶解方法

有效

• 申請號: 201410229339.9
• 申請日: 2014-05-27
• 公開（公告）號: CN105200103B
• 公開（公告）日: 2019-02-19
• 發明（設計）人: 吳仁安;胡爭艷;鄒漢法
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12N11/14
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳

本發明的目的在于提供一種介孔納米粒子表面蛋白質環冠的選擇性酶解方法。它省略了酶解前的蛋白質變性、還原及烷基化反應，減少了因蛋白質變性從介孔孔道內的流出，并利用介孔材料的排阻效應，通過將磁性固定化酶用于介孔材料表面蛋白質環冠的酶解和分析。該方法首次實現了介孔材料表面吸附的蛋白質環冠的選擇性酶解和分析，在消除了介孔納米材料孔道內吸附蛋白質的干擾的同時，達到了高效選擇性酶解和分析介孔材料表面蛋白質環冠的目的，對于我們正確理解作為藥物載體、基因載體等的介孔納米材料在與生物體相互作用時在生物體內的分布、堆積及排出產生重要的影響及其對生物體產生的影響等具有非常重要的意義。

技術領域

本發明屬于生物納米醫藥領域，具體涉及一種介孔材料表面蛋白質環冠的選擇性酶解方法。

背景技術

近年來，納米材料因其獨特的性質被廣泛用作藥物和基因載體。研究表明，納米材料可以綜合多靶向定位，傳感，診斷和治療等功能于一體且幾乎可以到達生物體的任何部位，從而進入腫瘤細胞內部進而殺死腫瘤細胞(文獻1.Moghimi,S.M.；Hunter,A.C.；Murray,J.C.Nanomedicine:Current status and future prospects,Faseb Journal，2005,19,311-330.)。然而，當納米材料進入生理環境(血液或細胞)時，其表面會迅速被蛋白質覆蓋，形成蛋白質環冠(文獻2.Lynch,I.；Dawson,K.A.Protein-nanoparticleinteractions,Nano Today2008,3,40-47.文獻3.Lundqvist,M.；Stigler,J.；Elia,G.；Lynch,I.；Cedervall,T.；Dawson,K.A.Nanoparticle size and surface propertiesdetermine the protein corona with possible implications for biologicalimpacts,Proc.Natl.Acad.Sci.2008,105,14265-14270.)。由于蛋白質環冠在納米材料表面的吸附，使得材料的尺寸、聚集狀態及其表面性質發生改變，同時導致其生物識別性質區別于材料的自身性質(材料合成時所具有的表面化學性質、大小、形狀)(文獻4.Lynch,I.；Salvati,A.；Dawson,K.A.Protein-nanoparticle interactions what does the cellsee？,Nat.Nanotechnol.2009,4,546-547.)。納米材料的生物識別性質是被生物大分子、細胞、生物界面等識別的材料的形態，決定了材料在生理系統內的運輸和活性等，更是引起納米材料在生物體內的生理反應的決定因素(文獻5.Nel,A.E.,et al.,Understandingbiophysicochemical interactions at the nano-bio interface,Nat.Mater.,2009,8,543-55.)。只有真正了解納米材料與蛋白質之間的相互作用機制才能有效的控制納米材料在生命醫藥領域的應用，否則可能會導致其錯誤的靶向正常細胞引起生物體的毒性，因此，有效的控制納米材料與生命系統之間的相互作用是納米藥物面臨的最基本的考驗。