[發(fā)明專利]水果蔬菜中雙胍辛胺殘留量檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410209344.3
• 申請(qǐng)日: 2014-05-19
• 公開（公告）號(hào): CN103983723A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任海濤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 萊陽恒潤(rùn)食品有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種水果蔬菜中雙胍辛胺殘留量檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

雙胍辛胺是世界上廣泛使用的農(nóng)藥，各國(guó)在水果蔬菜中都設(shè)置了嚴(yán)格的殘留基準(zhǔn)；目前國(guó)內(nèi)尚無此類檢測(cè)方法的報(bào)道，國(guó)際上有使用帶柱后衍生熒光檢測(cè)器的高效液相色譜儀的報(bào)道，但是該檢測(cè)方法比較麻煩。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于改進(jìn)已有技術(shù)提供一種能夠縮短檢測(cè)周期、提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度，降低檢出限的水果蔬菜中雙胍辛胺殘留量的檢測(cè)方法。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，水果蔬菜中雙胍辛胺殘留量檢測(cè)方法，其特點(diǎn)是該方法包括以下步驟：

a?、提取：

準(zhǔn)確稱取100.0?g樣品，加入25g鹽酸胍、100mL三乙胺溶液，攪碎混合均勻后，稱取上述混合物五分之一量，加入5g氯化鈉、100mL正丁醇：正已烷體積比為1：1的混合溶液，攪拌3分鐘后，以每分鐘3000轉(zhuǎn)離心分離10分鐘，將上清液移入預(yù)先裝有50mL三乙胺的300mL分液漏斗中，沉淀中加入50?mL正丁醇：正已烷體積比為1：1的混合溶液，攪拌3分鐘后以每分鐘3000轉(zhuǎn)離心分離10分鐘，合并上清液于分液漏斗中，搖勻后，靜置，棄去水層；在上述分液漏斗中，加入30mL水和2mL的1mol／L硫酸，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，合并水層于磨口減壓濃縮器中；在正丁醇和正已烷的混合溶液層中加入20mL水和0.5mL的1mol／L硫酸，用振蕩器激烈振蕩5分鐘后，靜置，合并水層于減壓濃縮器中，50℃以下濃縮至約2mL，殘留物中加入5mL?pH=6的磷酸鹽緩沖液后，加0.1mol／L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH為6；

b?、凈化：

在1000mg的羧甲基甲硅烷基化硅膠小柱中注入10mL甲醇，棄去流出液，再注入10mL水，棄去流出液，柱中注入a步驟提取方法所得到溶液后，棄去流出液；再注入5mLpH=6的磷酸鹽緩沖液，棄去流出液，注入10mL?0.1mol／L鹽酸甲醇溶液，收集流出液于磨口減壓濃縮器中，在40℃以下，除去鹽酸和甲醇，殘留物用乙腈定容2mL，此為試驗(yàn)溶液；

c、檢測(cè)：

使用儀器：液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（LC-MS-MS）；

儀器型號(hào)：液相色譜儀（LC）：Agilent1200；

串聯(lián)質(zhì)譜儀（MS-MS）：Agilent?6410；

液相色譜（LC）工作參數(shù)：色譜柱：Agilent?SB-C8?1.8μm?2.1×150mm

柱溫：50℃；

流速：0.3mL/min；

進(jìn)樣量：10μL；

甲酸乙酸銨水溶液：吸取1mL甲酸溶液，再稱取0.75g乙酸銨，用水稀釋到1000mL；

流動(dòng)相及洗脫條件：40%乙腈和60%甲酸乙酸銨水溶液等梯度洗脫；

串聯(lián)質(zhì)譜（MS-MS）工作參數(shù)：毛細(xì)管電壓：4000V；離子源溫度：350℃；去溶劑氣流：10L/min；掃描方式：正離子掃描；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；母離子357，子離子272、323；定量限：0.005?mg/kg。

本發(fā)明與已有技術(shù)相比具有以下顯著特點(diǎn)和積極效果：

1、在提取環(huán)節(jié)，提取過程中加入了鹽酸胍和三乙胺，三乙胺溶液能夠隱蔽玻璃器具的硅烷醇基，避免了雙胍辛胺被吸附在玻璃器皿上；加入鹽酸胍可以防止雙胍辛胺被植物成分吸附；加入這兩種物質(zhì)可以極大的提高雙胍辛胺的回收率，相對(duì)于傳統(tǒng)檢測(cè)方法提高了回收率30%，也就提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2、檢測(cè)環(huán)節(jié)使用了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（LC-MS-MS），優(yōu)點(diǎn)是不需要進(jìn)行柱后衍生，可以直接進(jìn)行檢測(cè)，大大縮短了檢測(cè)周期，同時(shí)液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀是更先進(jìn)的設(shè)備，大大降低了檢出限。以青梗菜為待測(cè)品，以傳統(tǒng)方法檢測(cè)，檢出雙胍辛胺含量為0.024mg/kg，如進(jìn)行回收率校正后的結(jié)果為0.040mg/kg,檢測(cè)一個(gè)樣品所需時(shí)間5h，以本方法進(jìn)行檢測(cè)，同一樣品檢出雙胍辛胺含量為0.042mg/kg，檢測(cè)一個(gè)樣品所需時(shí)間2.5h；檢出限降低，以葡萄為例，以傳統(tǒng)方法（0.02mg/kg）檢出限，檢測(cè)結(jié)果為未檢出（低于檢出限），以本方法檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為0.009mg/kg。

本發(fā)明方法的準(zhǔn)確度、精密度及檢出限分析如下：