[發明專利]一種阿維菌素B2a的提取方法

有效

• 申請號: 201410209019.7
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN103992365A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 梁劍光;劉亮;陳中兵;孫振華;孫俊杰;黃海濤;趙祖亮;羅小芳;張華弟;呂福亮
• 申請（專利權）人: 浙江升華拜克生物股份有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務所有限公司 33214
• 代理人: 王從友

技術領域

本發明涉及一種阿維菌素B_2a的制備方法，特別是一種阿維菌素B_2a的提取方法。

背景技術

阿維菌素(Avermectins)是由阿維鏈霉菌(Streptomyces?avermitilis)產生的一組結構相似的十六元大環內酯齊敦果糖雙糖衍生物，1975年由日本北里研究所從日本靜岡縣的一個土壤樣品中分離得到。阿維菌素具有廣譜、高效抗各種線蟲和人類寄生蟲的活性。阿維菌素殺蟲和抗寄生蟲機制較為獨特，與其它抗寄生蟲藥物無交叉耐藥性、毒性低、無殘留等優點，因此阿維菌素是至今發現最有效的殺蟲劑（包括殺螨蟲）之一。阿維菌素有八種組分（A組分4種和B組分4種）：即A_la，A_lb，A_2a，A_2b，B_la，B_lb，B_2a，B_2b，通常只有B_l具有藥效，并以B_la活性最高。作為比較成熟的生物農藥產品，在過去的幾十年內，阿維菌素主要集中研究B_1a,然而目前研究表明，在B組分中，除B_1a外，其他三種組分如B_2a也有較大應用價值。

由于B_2a也具有類似于B_1a的活性官能團結構，因此類似于B_1a系列的下游產品存在了一定的理論和現實依據，?B_2a即是其中重要的組分。然而，制備出純度較高的B_2a精品還有賴于精提工藝的開發。通常目前的阿維菌素B_2a是阿維菌素發酵菌渣中除阿維菌素B_1a外的另一主要活性組分，在完成對B_1a的提取精制后，主要存在于結晶母液中。據有關報道，阿維菌素B_2a其藥效比現在市場上的阿維菌素B_1a藥效更佳，而且毒性更小，但是由于沒有一種有效的提取分離阿維菌素B_2a的工藝，所以目前市場上未見其精品。導致當前阿維菌素B_2a通常都是用來配制阿維菌素B_1a油膏。隨著市場對阿維菌素B_1a油膏的限制使用，對于阿維菌素B_1a結晶母液的后處理問題越來越重要，而對于單組分阿維菌素發酵菌渣來說，其結晶母液中主要成分是阿維菌素B_2a。因此，從阿維菌素B_2a的藥效來看，應該比阿維菌素B_1a具有更大的市場潛力，而且還具備進一步開發阿維菌素B_2a下游產品（如伊維菌素）的潛力。因此，我們在開發阿維菌素B組分菌種的過程中，需要解決目前生產阿維菌素B_2a過程如何提取B_2a精品的問題，這樣不僅解決了市場對阿維菌素B_1a油膏的限制使用所帶來的隱患，而且還進一步拓展了阿維菌素系列產品的生存空間，意義重大。

關于阿維菌素B_2a提取的報道，主要有兩種方法：一種是在正己烷和乙醇復合溶劑中結晶；一種是采用硅膠層析分離。申請人通過小試摸索結晶方法，已經從阿維菌素B_1a結晶母液中獲得了含量80%以上的阿維菌素B_2a，而且產品具有良好的外觀。目前，對阿維菌素B_2a的研究提取工藝主要有：超臨界CO₂萃取工藝、超聲波提取工藝以及常規的乙醇回流提取工藝，通過結晶純度可達到80.21％。如CN專利201210548729公開了一種阿維菌素B_2a的提取制備方法，其主要是將阿維菌素混合組分的發酵液制成干菌絲體，通過一般浸提、濃縮后進行甲苯萃取獲得母液，在母液中重新進行甲苯萃取和結晶，獲得阿維菌素B_2a粗品，該發明采用發酵液制成干菌體，勞動強度大，在工業階段難以實現，而且通過單一溶劑的浸提、濃縮難以達到實際效果。而US5077398雖采用正己烷和乙醇復合溶劑，但在實際試驗過程中正己烷價格較高，使用效果不佳，制備阿維菌素B_2a也很難實現?，F有技術均未對發酵液的色素進行脫色，會導致發酵液的色素積累影響阿維菌素的結晶過程。

發明內容