[發明專利]全真一氣湯多糖的提取純化的方法

有效

• 申請號: 201410188742.1
• 申請日: 2014-05-06
• 公開（公告）號: CN103992415A
• 公開（公告）日: 2014-08-20
• 發明（設計）人: 張志敏;張大鵬;武志娟;趙雅;任培華;梁金羽;朱敬杰;韓福國;劉清飛
• 申請（專利權）人: 廣州醫科大學附屬第一醫院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為

1.一種全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，依次包括下述步驟：

1)按全真一氣湯配方比例稱取熟地黃、白術、人參、麥冬、五味子、附子、牛膝，除熟地外，其余藥材干燥，粉碎；

2)將熟地切段，與步驟1)粉碎后的藥材混合，用超聲提取法提取藥材1-3次，每次7-9倍水提取25-35min后粗濾，靜置過夜后離心分離，取上清液；

3)將步驟2)中的上清液濃縮至相對密度為1.15-1.2，用乙醇調至藥液乙醇含量為75-85％，靜置后離心分離，取下層沉淀用乙醇洗滌后于55-65℃真空干燥得粗多糖A；

4)取步驟3)粗多糖A加水溶解，搖勻，酸調節pH至5-6，加入木瓜蛋白酶,在45-55℃，酶解4-6h，滅活，離心除去沉淀，取下層液得粗多糖酶解液B；

5)向步驟4)粗多糖酶解液B中加入其體積1/4-1/6的氯仿-正丁醇溶液，震蕩，靜置過夜，收集上層水相溶液，得到多糖溶液B；

6)取步驟5)多糖溶液B，加水配制成濃度為3-5mg/ml的溶液，調節多糖溶液的pH至4.5-5.5，加入大孔樹脂在45-55℃水浴下攪拌1-3h，過濾的粗多糖B；

7)取步驟6)粗多糖B加水制成濃度為4-6mg/mL的溶液，將溶液裝入透析袋中，封好兩端，放入水中透析，每隔20-28h換一次水，48h后，取出透析袋中的溶液，55-65℃真空干燥即得精多糖。

2.據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟1)所述的干燥溫度均為60℃。

3.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟2)所述的超聲條件為在室溫下超2s停2s，功率800w。

4.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟2)、步驟3)和步驟4)所述的離心條件均為5000rpm×10min。

5.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟3)所述的上清液濃縮是在60℃旋轉蒸發至藥液相對密度為1.15-1.2。

6.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟4)所述的酸為冰醋酸。

7.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，取步驟2)粗多糖A:水:木瓜蛋白酶的質量比是1：50:1.5。

8.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟4)所述的滅活是沸水浴滅活5min。

9.根據權利要求1所述的全真一氣湯多糖的提取純化的方法，其特征在于，步驟6)所述的大孔樹脂是大孔樹脂AB-8。