[發(fā)明專利]一種治療心腦血管疾病的中藥注射液的指紋圖譜測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410185466.3
• 申請(qǐng)日: 2014-05-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103926364A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙濤;趙超
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東丹紅制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種治療心腦血管疾病的中藥注射液的指紋圖譜測(cè)定方法，具體來(lái)說(shuō)是一種用高效液相色譜法指紋圖譜方法來(lái)測(cè)定中藥注射液中的有效物質(zhì)成分，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

中藥注射劑是一個(gè)創(chuàng)新劑型，由于具備作用迅速、療效確切等優(yōu)點(diǎn)，能彌補(bǔ)傳統(tǒng)中藥見(jiàn)效慢的缺點(diǎn)，因而發(fā)展迅速，目前在心腦血管和抗腫瘤類中成藥市場(chǎng)份額中居前10位的產(chǎn)品中，中藥注射劑產(chǎn)品已經(jīng)占有半數(shù)，并且已成為中藥領(lǐng)域中市場(chǎng)份額最大的劑型。但由于近年來(lái)，中藥注射液的不良反應(yīng)報(bào)道也逐年增多，為此，建立能夠被國(guó)際醫(yī)藥行業(yè)接受的中藥注射液的質(zhì)量控制體系是目前醫(yī)藥領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。中藥質(zhì)量控制是中藥現(xiàn)代化的重要內(nèi)容，指紋圖譜技術(shù)被認(rèn)為是中藥質(zhì)量控制研究的有效手段。中藥指紋圖譜能比較全面地反映中藥復(fù)方中化學(xué)物質(zhì)的種類與數(shù)量，且指紋圖譜中對(duì)多個(gè)目標(biāo)成分尤其是有效成分進(jìn)行準(zhǔn)確定量，尤其對(duì)中藥注射液進(jìn)行指紋圖譜質(zhì)量控制顯得尤為重要，能更真實(shí)反映中藥注射液的有效成分?jǐn)?shù)量和含量組成，使得產(chǎn)品質(zhì)量控制更加準(zhǔn)確，進(jìn)一步保證產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量。

丹紅注射液是由菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司獨(dú)家生產(chǎn)，在臨床中治療心腦血管疾病效果顯著，該制劑是由丹參、紅花藥材制備而成，具有活血化瘀，通脈舒絡(luò)的功效。可以用于瘀血閉阻所致的胸痹及中風(fēng)，并見(jiàn)胸痛，胸悶，心悸，口眼歪斜，言語(yǔ)蹇澀，肢體麻木，活動(dòng)不利等癥；冠心病、心絞痛、心肌梗塞，瘀血型肺心病、缺血性腦病、腦血栓患者。對(duì)于該中藥注射液我們先申請(qǐng)了公開(kāi)號(hào)CN102233001A的專利，其公開(kāi)了處方制備工藝及質(zhì)量檢測(cè)方法，由于本發(fā)明中藥注射液有良好的臨床效果且市場(chǎng)銷售前景廣闊，而目前對(duì)該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅對(duì)丹參素鈉、原兒茶醛和總黃酮含量進(jìn)行控制，這顯然對(duì)控制中藥注射液內(nèi)在質(zhì)量是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。

近年來(lái)，指紋圖譜技術(shù)已經(jīng)成為中藥復(fù)方質(zhì)量控制與評(píng)價(jià)的重要手段，該技術(shù)已經(jīng)在本領(lǐng)域中運(yùn)用的比較成熟，成為當(dāng)下對(duì)中藥復(fù)方質(zhì)量新的控制點(diǎn)，因此本發(fā)明所述的技術(shù)方案，意在提高所述產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證中藥注射液質(zhì)量的安全性和療效的有效性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種能夠全面、有效、可靠的控制丹紅注射液的質(zhì)量的指紋圖譜檢測(cè)方法，通過(guò)該方法獲得比較全面的多種成分的指紋圖譜信息，從而能為更好評(píng)價(jià)中藥注射液內(nèi)在質(zhì)量全面控制提供參考依據(jù)。該方法具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，重現(xiàn)性及穩(wěn)定性良好等特點(diǎn)。

本發(fā)明本品指所述的中藥注射液，均是指由菏澤步長(zhǎng)制藥有限公司生產(chǎn)的丹紅注射液。

該中藥注射液具體的制備方法如下：取丹參750g，紅花50g，加水煎煮二次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.30(65℃)的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)75～80％，冷藏，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.30(65℃)的清膏，放冷，加乙醇使含醇量達(dá)80～85％，冷藏，取上清液，加入約為投料量1％的活性炭，攪拌30分鐘，靜置，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，加注射用水至配置量，攪勻，加熱煮沸40～50分鐘，冷藏，濾過(guò)，濾液濃縮至配置量的1/3，冷藏，濾過(guò)，濾液用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至6.5～7.5，加熱煮沸40～50分鐘，加入約為藥液量0.5％的活性炭，攪勻，藥液溫度降至50℃，靜置，濾過(guò)，濾液經(jīng)超濾后，加入約為藥液量0.5％的活性炭，濾過(guò)，濾液加注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)pH值至6.5～7.5，濾過(guò)，灌封，滅菌，即得。

以下是對(duì)上述中藥注射液該檢測(cè)方法所建立的指紋圖譜測(cè)定方法，該方法包括如下的步驟：

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05％三氟乙酸溶液為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速為每分鐘0.8ml，柱溫為40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為288nm。理論板數(shù)按丹酚酸A峰計(jì)算應(yīng)不低于200000。

表1各流動(dòng)相配比表

參照物溶液的制備：取丹參素鈉對(duì)照品、原兒茶醛對(duì)照品、4-香豆酸對(duì)照品、迷迭香酸對(duì)照品、丹酚酸B對(duì)照品和丹酚酸A對(duì)照品適量，置棕色量瓶中，精密稱定，加0.2％冰乙酸的10％甲醇溶液制成每1ml含丹參素鈉0.25mg、原兒茶醛30μg、4-香豆酸10μg、迷迭香酸30μg、丹酚酸B40μg和丹酚酸A30μg的混合溶液，即得。

供試品溶液的制備：精密量取本品2ml，置10ml量瓶中，加0.2％冰醋酸的10％甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

測(cè)定法分別精密吸取上述兩種溶液各5μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。