[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于檢測(cè)肉品中藥物殘留的方法及其試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410183213.2
• 申請(qǐng)日: 2014-04-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103983707A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王宏衛(wèi);郭黎明;饒欽雄;張寶;李宗進(jìn)
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京華都肉雞公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 北京名華博信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11453
• 代理人: 李冬梅;苗源

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種藥物殘留檢測(cè)，尤其涉及一種用于檢測(cè)肉品中藥物殘留的方法及其試劑盒。?

背景技術(shù)

目前許多肉品企業(yè)都要進(jìn)行金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)藥物的殘留檢測(cè)，樣品的前處理是殘留檢測(cè)的重要步驟，也是最消耗時(shí)間和試劑的步驟。但是現(xiàn)有肉品中金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)藥物的殘留檢測(cè)的前處理只能做單種藥物殘留的前處理，效率低，需要很長(zhǎng)的時(shí)間進(jìn)行處理，有機(jī)試劑的消耗量大，造成肉品企業(yè)應(yīng)用時(shí)成本很高。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中的肉品中金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)藥物殘留檢測(cè)的前處理只能做單類(lèi)藥物殘留的前處理的問(wèn)題，進(jìn)而提出一種對(duì)這三類(lèi)藥物的前處理方法進(jìn)行了整合，設(shè)計(jì)出能同時(shí)進(jìn)行金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)藥物的殘留檢測(cè)的前處理方法的試劑盒。?

本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N用于檢測(cè)肉品中藥物殘留的試劑盒，其包括混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱，金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)和磺胺類(lèi)藥物的萃取液，第一淋洗液、第二淋洗液、洗脫液和復(fù)溶液。?

其中，所述試劑盒還包括50mL聚丙烯材質(zhì)可立離心管和10mL聚丙烯材質(zhì)離心管。?

其中，所述試劑盒還包括過(guò)濾器。?

其中，所述過(guò)濾器為0.22微米過(guò)濾器。?

所述萃取液含有2-5體積％的甲酸、乙酸或三氯乙酸，50-70體積％的甲醇，以及其余體積的水。?

所述第一淋洗液為1-5體積％鹽酸或甲酸的水溶液；?

所述第二淋洗液為色譜級(jí)甲醇或乙腈；?

所述洗脫液為50-80體積％氨水的甲醇溶液；?

所述復(fù)溶液為乙酸/甲醇/水溶液，所述乙酸/甲醇/水溶液中的乙酸、甲醇和水體積比1：20：79。?

本發(fā)明還提供了一種用于檢測(cè)肉品中藥物殘留的方法，該方法包括以下步驟：?

(1)萃取分離?

將樣品放入所述萃取液中振蕩，然后進(jìn)行離心分離，得到上清液；?

(2)所述上清液的處理?

所述上清液通過(guò)所述混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱，然后依次使用第一淋洗液和第二淋洗液進(jìn)行淋洗，再使用所述洗脫液進(jìn)行洗脫處理，濃縮后用所述復(fù)溶液進(jìn)行復(fù)溶，得到待檢測(cè)的樣品溶液；?

(3)檢測(cè)分析?

所述樣品溶液進(jìn)行色譜分析和/或質(zhì)譜分析。?

(4)結(jié)果處理與分析?

其中，所述上清液的具體處理步驟包括：取適量上清液通過(guò)混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱，使用1-5％鹽酸或甲酸的水溶液，色譜級(jí)甲醇或乙腈依次淋洗；50-80體積％氨水的甲醇溶液進(jìn)行洗脫處理，收集洗脫液，70℃下旋蒸或氮?dú)獯蹈桑盟鰪?fù)溶液進(jìn)行復(fù)溶。?

其中，所述上清液的處理步驟還包括：使用過(guò)濾器對(duì)所述樣品溶液進(jìn)行過(guò)濾。?

其中，所述樣品溶液進(jìn)行色譜分析的條件為:柱溫：42℃；樣品室溫度10℃；進(jìn)樣體積10μL；流動(dòng)相A為含0.1％(體積分?jǐn)?shù))甲酸的水，流動(dòng)相?B為乙腈，梯度洗脫；?

所述樣品溶液進(jìn)行質(zhì)譜分析的條件為:離子源:電噴霧電離(ESI+)；IonSpray?voltage5500V；溫度600℃；Ion?Source?Gas60L/h；氣簾氣35L/h；碰撞氣:氮?dú)猓捎枚喾磻?yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式。?

與有關(guān)技術(shù)相比，本發(fā)明實(shí)施例的有益效果如下：?

(1)本發(fā)明將這三類(lèi)藥物的前處理方法進(jìn)行了整合，設(shè)計(jì)出能同時(shí)進(jìn)行金剛烷胺、喹諾酮類(lèi)、磺胺類(lèi)藥物殘留檢測(cè)的前處理方法試劑盒，本方法試劑盒可以對(duì)以上三類(lèi)藥物同時(shí)進(jìn)行前處理；前處理完成后即可使用常規(guī)技術(shù)進(jìn)行樣品的色譜或質(zhì)譜分析。?

(2)本方法可以減少3/4有機(jī)試劑的消耗；?

(3)本方法采用了優(yōu)化的固相萃取柱填料量和管徑的比值，在保證吸附效果的同時(shí)，樣本過(guò)柱速度提高1倍；?

(4)使殘留檢測(cè)的前處理更為方便、高效、標(biāo)準(zhǔn)。?

具體實(shí)施方式

以下將以實(shí)施例的方式對(duì)本發(fā)明做出進(jìn)一步的說(shuō)明。需要說(shuō)明的是，在不沖突的情況下，本申請(qǐng)中的實(shí)施例及實(shí)施例中的特征可以相互任意組合。?

實(shí)施例1(雞肉中金剛烷胺、氧氟沙星、磺胺嘧啶多殘留檢測(cè))?

(1)試劑盒包括：?

50mL離心管為聚丙烯材質(zhì)帶0.5毫升分度刻度的可立離心管，20支；?

10mL離心管為聚丙烯材質(zhì)帶0.1毫升分度刻度的離心管，20支；?

固相萃取柱：混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱(填料質(zhì)量為60mg，柱體積為6毫升，無(wú)需激活，提取上清液可直接過(guò)柱)；?