[發明專利]一種結核分枝桿菌潛伏感染的診斷試劑盒

有效

• 申請號: 201410182365.0
• 申請日: 2014-04-30
• 公開（公告）號: CN103954755B
• 公開（公告）日: 2017-04-05
• 發明（設計）人: 陳濤;鐘球;周琳;陳亮;畢利軍;李海成;郭卉欣;周杰;王威;廖慶華;陳瑜暉;蔣莉;尹建軍;舒楊
• 申請（專利權）人: 廣東省結核病控制中心
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205
• 代理人: 鄭瑩

技術領域

本發明屬于免疫診斷領域，具體涉及一種結核分枝桿菌潛伏感染的診斷試劑盒。

背景技術

結核病是一個于人類發展史并存的古老疾病，目前仍是一個全球性的衛生問題，全世界估計有三分之一的人口感染過結核分枝桿菌，在這些感染人群中將會有10％的進展為活動性結核。每年新發病例1000萬，超過300萬人死亡。鑒于對人類生命健康的威脅，世界醫學工作者一直沒有放松對結核病的研究。結核病的發病流程一般是由健康人群到感染人群，然后經歷時間長短不一的潛伏期發展成為活動性結核病。流行病學顯示全球人口三分之一是結核分枝桿菌的感染者，如何及時發現、確定結核分枝桿菌的感染人群是實驗現結核病一級預防的前提。

目前臨床現有結核病潛伏感染診斷技術主要是PPD和IFN-γ釋放實驗。PPD是目前應用最廣泛的一種方法，但是其結果判讀時間長、結果判讀主觀性強、敏感性差等缺點。IFN-γ釋放實驗報告時間兩天，檢測效能較PPD有所提高，但是其操作繁瑣，包括血液采集、細胞分離、細胞刺激培養、免疫學反應、上機檢測等多個步驟，且其需要專用的昂貴設備，普及到基層組織不現實。

發明內容

針對現有技術所存在的問題，本發明通過蛋白芯片技術批量篩選獲得能有效區分未感染人群與結核分枝桿菌潛伏感染患者的細胞因子組合，并結合檢測血清中的特異性抗體，開發一種準確性高、靈敏性高、操作簡便、檢測速度快的結核分枝桿菌潛伏感染的血清學免疫診斷試劑盒。

本發明的目的在于提供一種結核分枝桿菌潛伏感染的診斷試劑盒。

本發明所采取的技術方案是：

一種結核分枝桿菌潛伏感染的診斷試劑盒，該試劑盒能特異性識別細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF或IL-12p70中至少一個。

進一步的，上述試劑盒可對細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF或IL-12p70中至少一個進行定量。

進一步的，上述試劑盒能特異性識別細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p70，同時能對這5種細胞因子的含量分別進行定量。

進一步的，上述試劑盒能特異性識別細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p70，同時能對這5種細胞因子的含量分別進行定量，且能特異性識別結核分枝桿菌抗原38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和Ag85B的特異性IgG抗體。

進一步的，上述試劑盒的檢測原理為ELISA原理。

本發明的有益效果是：

1)本發明通過蛋白芯片技術及生物信息學方法進行批量篩選，從中篩選獲得5種表達差異最顯著的細胞因子(Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7)作為結核分枝桿菌潛伏感染的檢測標志物，能夠有效區分未感染人群與結核分枝桿菌潛伏感染患者，且其表達量高，可提高診斷的靈敏度。

2)38-KDa、32-KDa、14-16-KDa及AG85B是結核分枝桿菌的特異性菌體抗原，能夠在結核分枝桿菌潛伏感染患者體內誘導相應的特異性IgG抗體產生，在檢測上述5種細胞因子的同時，再聯合檢測這4種抗原的特異性抗體，可進一步加強診斷結核分枝桿菌潛伏感染的準確性和靈敏性。

3)利用蛋白芯片技術，將上述5種細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7)的特異性抗體以及38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和AG85B抗原點制成芯片，制成利用ELISA原理檢測的試劑盒，從而能夠在48小時內檢測出不同人群外周血中的細胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7，及抗原38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和AG85B的特異性IgG抗體的含量，從而為結核分枝桿菌潛伏感染提供一種更為有效的免疫診斷手段，具備有效的準確性和靈敏性，且操作簡便，檢測時間快，適于推廣應用。

4)ELISA原理檢測血清當中的標志物，操作簡單，不需要昂貴的設備，技術成熟，是普遍使用的檢測原理，相對目前臨床所應用的IFN-γ釋放實驗，本發明直接針對血清標志物，省去了細胞分離、培養、刺激、孵育等繁瑣的步驟，直接針血清中的標志物進行檢查，可以方便、快速、穩定地得到檢測結果。

附圖說明

圖1為結核分枝桿菌潛伏感染者(左)和健康者(右)血清樣本的芯片掃描熒光信號圖；