[發明專利]一種甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法

有效

• 申請號: 201410181451.X
• 申請日: 2014-04-30
• 公開（公告）號: CN103919738A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 侯振清;藺金燕;李巖秀;李陽;侯魯
• 申請（專利權）人: 廈門市殼聚糖生物科技有限公司
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K31/519;A61K47/34;A61P35/00
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務所 44275
• 代理人: 張明

技術領域

本發明涉及抗腫瘤藥物制劑領域，具體涉及一種防止惡性腫瘤生長和復發的甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法。

背景技術

甲氨喋呤(MTX)是一種葉酸類抗代謝藥劑，能與腫瘤細胞表面的葉酸受體進行結合起到很好的靶向作用，常用于各種惡性腫瘤治療，也是常用的抗風濕藥物。MTX在藥用上也有許多不利之處，治療腦部腫瘤時很少量能通過血腦屏障。本品可增加肝腎功能毒性，由于藥物作用機理是通過對二氫葉酸還原酶的抑制而達到阻礙腫瘤細胞DNA的合成，所以對正常的生物細胞也有藥物作用，毒副作用較大。

經過兩親性高分子修飾的甲氨蝶呤前藥具有提高藥物的靶向性和藥物的生物利用度，減少藥物的毒副作用等優點，而且自組裝形成的納米粒子作為藥物載體進入體內，可以有效地減少人體網狀內皮系統(RES)巨噬細胞的吞噬。作為納米級的粒子能穿越細胞間隙，可通過人體最小的毛細血管及血腦屏障(BBB)，并被細胞組織吸收，納米粒子藥物載體可以運載藥物到達靶向部位控制藥物釋放、減少藥物用量、增強藥物療效并降低藥物毒性。同時，納米粒子藥物系統可以避免藥物活性喪失，有利于藥物的貯藏和運輸。因為納米粒子的諸多優點，使其成為一種很有前途的藥物新劑型，故在癌癥的治療方面備受關注。

目前關于高分子前藥的報道越來越多，應用越來越廣泛，本發明人之前申請的中國專利申請號為：201310239345.8，名稱為：一種甲氨喋呤靶向納米粒緩釋制劑及其制備方法，其是將甲氨蝶呤化學交聯到高分子載體上，但該載體是MPEG-PLA，該制劑中的靶向納米粒子粒徑較大，一般大于200nm，屬于實體粒子，該粒子釋藥非常緩慢，比較適合作為腫瘤局部注射用，靜脈注射應用受到一定的限制。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種利用柔性分子載體制備的粒徑小，適合作為靜脈用靶向腫瘤制劑的甲氨喋呤前藥及其膠束制劑和制備方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：提供一種甲氨喋呤前藥，其原料包括甲氨喋呤原料藥和載體材料，所述載體材料為DSPE-PEG-NH₂。

本發明的另一技術方案為：提供一種甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法，包括如下步驟：

1)將DSPE-PEG-NH₂溶于有機溶劑中，得溶液A；MTX溶于DMSO水溶液中，得到溶液B；在溶液B中加入TEA和交聯劑，所述交聯劑為DCC和NHS，將溶液A、B混合，在氮氣保護下反應12h，得到溶液C；

2)將步驟1)所得溶液C依次置于磷酸鹽緩沖液和去離子水中透析去除雜質，透析液凍干得到MTX-PEG-DSPE化合物凍干品；

3)將步驟2所得MTX-PEG-DSPE化合物凍干品用有機溶劑溶解，通過超聲乳化或透析法去除有機溶劑后凍干，消毒得MTX前藥靶向膠束制劑。

本發明的又一技術方案為：提供一種上述的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑的制備方法制備的甲氨喋呤前藥靶向膠束制劑。

本發明解決了現有技術中甲氨喋呤靶向納米粒子粒徑較大，釋藥非常緩慢，只適合作為腫瘤局部注射用，靜脈注射應用受到一定限制的技術問題。利用柔性分子載體(DSPE-PEG-NH₂)與MTX原料藥化學健合制備MTX前藥，然后進一步制成膠束，該膠束為柔性粒子，粒徑在100nm左右，適合作為靜脈用靶向腫瘤制劑，其靜脈注射具有靶向性強、長循環和低毒性的特點，使其更容易達到腫瘤組織發揮藥效。

附圖說明

圖1為本發明實施例中DSPE-PEG-NH₂與MTX合成MTX-PEG-DSPE的簡要示意圖；

圖2為本發明實施例中MTX-DSPE-PEG的核磁共振圖譜，其中8.6，7.7，6.8是MTX的特征峰；

圖3為本發明實施例中MTX-DSPE-PEG和載體材料DSPE-PEG-NH2的紫外及可見分光光譜；

圖4為本發明實施例中MTX前藥靶向膠束制劑的透射電鏡照片，其標尺為200nm；

圖5為本發明實施例中MTX前藥靶向膠束制劑在不同pH的PBS緩沖液中的釋藥曲線圖；

圖6為本發明實施例中MTX前藥靶向膠束制劑腫瘤細胞靶向實驗(包括激光共聚焦分析和流式細胞實驗)的結果圖；

圖7為本發明實施例中MTX前藥膠束制劑與裸藥MTX的腫瘤細胞毒性實驗結果圖；

圖8為本發明實施例中MTX前藥靶向膠束在荷瘤裸鼠靜脈注射后的腫瘤靶向實驗及結果圖。

具體實施方式