[發(fā)明專利]一種流感病毒通用疫苗及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410173067.5 | 申請日： | 2014-04-26 |
| 公開（公告）號： | CN103948942A | 公開（公告）日： | 2014-07-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 單虎;李桂梅;黃娟;張傳美;劉煥 | 申請（專利權(quán)）人： | 青島農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | A61K48/00 | 分類號： | A61K48/00;A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 266109 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 流感病毒 通用 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種流感病毒通用基因疫苗，其特征在于：由克隆有流感H1N1病毒株的HA2基因的pCAGGS真核表達(dá)載體構(gòu)成。?
2.一種流感病毒通用基因疫苗的制備方法，包括如下步驟：?
1)流感H1N1病毒株的HA2基因的獲取；?
2)流感病毒重組質(zhì)粒的制備；?
3)將重組質(zhì)粒進(jìn)行濃度調(diào)整，分裝至不同EP管中，獲得疫苗成品。?
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的流感H1N1病毒株的HA2基因的獲取步驟包括：將A/Puerto?Rico/8/1934(H1N1)病毒株倍比稀釋，并將稀釋產(chǎn)物接種9-11日齡的SPF雞胚，進(jìn)行病毒的大量擴(kuò)增，48h后收取雞胚尿囊液，利用引物進(jìn)行HA2基因的大量擴(kuò)增，并對其進(jìn)行產(chǎn)物回收。?
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，引物序列為：?
正向引物：5’-ATCGATGGTCTATTTGGAGCCAT-3’?
反向引物：5’-AGATCTGATGCATATTCTGCACT-3’。?
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4所述的制備方法，其特征在于，流感病毒重組質(zhì)粒的制備步驟包括：對獲取的HA2基因及pCAGGS真核表達(dá)載體進(jìn)行ClaⅠ/BglⅡ雙酶切，對產(chǎn)物進(jìn)行回收及連接轉(zhuǎn)化，并作大量擴(kuò)增，從克隆產(chǎn)物中提取重組質(zhì)粒。?
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的轉(zhuǎn)化及大量擴(kuò)增是將目的基因與表達(dá)載體連接，并將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)入DH5α大腸桿菌中，利用常見的含有氨芐青霉素的LB溶液過夜培養(yǎng)。?
7.流感H1N1病毒株的HA2基因和pCAGGS真核表達(dá)載體在制備流感病毒通用基因疫苗中的用途。?
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