[發(fā)明專利]一種從枇杷葉中提取精制熊果酸的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410167857.2
• 申請(qǐng)日: 2014-04-24
• 公開（公告）號(hào): CN103923159A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝君
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長沙麓園生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07J63/00
• 分類號(hào): C07J63/00
• 代理公司: 長沙市融智專利事務(wù)所 43114
• 代理人: 潘傳軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然植物提取物制備領(lǐng)域，尤其是從枇杷葉中提取精制熊果酸的方法。

背景技術(shù)

熊果酸(ursolic?acid，簡稱UA)又名烏索酸、烏蘇酸，分子式為C₃₀H₄₈O₃，為烏蘇烷型三萜，屬ɑ-香樹脂醇型五環(huán)三萜類化合物，在植物界分布較廣，以枇杷葉、山楂葉為主。熊果酸為白色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)227-228℃，易溶于二氧六環(huán)、吡啶，溶于甲醇、乙醇、丁酮，略溶于丙酮，微溶于苯、氯仿、乙醚，不溶于水和石油醚。

熊果酸具有廣泛的生物學(xué)活性，現(xiàn)代藥學(xué)研究表明，熊果酸具有消炎、增強(qiáng)免疫、抑制血小板凝集、降血糖、抗腫瘤、降血脂、抗病毒、保肝等臨床藥理作用，是治療急性黃疸型肝炎和慢性病毒性肝炎的理想藥物，且毒性低，副作用少。

目前國內(nèi)外已經(jīng)開展了對(duì)枇杷葉中熊果酸進(jìn)行分離純化的初步研究，但是現(xiàn)有方法步驟相對(duì)比較繁瑣,提取率低，成本過高，不僅延長了生產(chǎn)時(shí)間,增加了生產(chǎn)設(shè)備，而且大大增加了生產(chǎn)成本，不利于產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

為克服上述弊端，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種從枇杷葉中提取精制熊果酸的方法，能從枇杷葉中制備高純度熊果酸，具有技術(shù)合理、操作安全、工藝簡便、經(jīng)濟(jì)可行、環(huán)境友好等特點(diǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是，一種從枇杷葉中提取精制熊果酸的方法，其特征在于，該提取方法包括以下步驟：

(1)取鮮的或曬干處理過的枇杷葉粉碎，過10～12目篩；再將粉碎后的枇杷葉與乙醇、司盤-65或司盤-85中的任意一種混合均勻，司盤-65或司盤-85的加入量為粉碎后的枇杷葉與乙醇總重量的0.1～0.8％，然后進(jìn)行超聲波提取,用8～10倍95％乙醇溶液提取2次,提取溫度為70～80℃；濾去藥渣后,合并濾液,過O.1～1.0μm孔徑的微孔濾膜，濾液用截留分子量為1000Da～5000Da的膜超濾，得超濾液；

(2)將超濾液濃縮至溶液相對(duì)密度為1.1～1.2g/ml，進(jìn)行真空干燥，控制真空度≥0.08Mpa,溫度50℃～60℃,得純度為70％～85％的粗品熊果酸；

(3)將粗品熊果酸粉碎,加入2倍重量的硅膠混勻,裝入硅膠柱的頂端,硅膠柱中的硅膠裝填重量為粗品熊果酸的6倍,用無水乙醇洗脫,自檢識(shí)濃縮液有沉淀起開始收集,至沉淀極少時(shí)停止收集,合并此段乙醇洗脫液；將乙醇洗脫液轉(zhuǎn)入攪拌罐中,在不斷攪拌下加入溶液量0.5％的活性碳脫色,攪拌10min后,板框過濾,得濾液；將濾液真空減壓濃縮至無醇味,控制真空度≥0.07Mpa,溫度50℃～60℃；靜置沉淀4h；沉淀完全以后,抽濾,得類白色沉淀；再加入沉淀重量15倍濃度80％～85％乙醇,加熱至沸騰,在結(jié)晶罐中逐漸放冷至結(jié)晶完全；分取結(jié)晶,母液繼續(xù)濃縮,同法操作得二次結(jié)晶,合并第1次與第2次結(jié)晶,送真空干燥,控制真空度≥0.08Mpa,溫度50℃～60℃,得純度為95％～99％的精制熊果酸。

采用本發(fā)明的技術(shù)方案，在特定步驟加入了特定量的司盤-65或司盤-85，能降低枇杷葉藥材與乙醇溶劑之間的表面張力，使?jié)櫇窠亲冃。龠M(jìn)藥材表面的潤濕性，增加藥材細(xì)胞的滲透性，使溶劑最大限度地溶解或增溶藥材中有效成分，進(jìn)而顯著增大枇杷葉中熊果酸提取的收率。同時(shí)，在溶液中加入司盤-65或司盤-85后，能有效提高溶液的澄清度，便于過濾，在微孔濾膜中不會(huì)堵塞膜孔，便于后續(xù)工作的進(jìn)行。

本發(fā)明中采用了微孔濾膜和超濾膜的分子篩過濾組合，有效去除大分子物質(zhì)，提高了有效成分熊果酸的提取率。在傳統(tǒng)的從枇杷葉中提取熊果酸的生產(chǎn)方法，大多采用了脫色、上柱吸附、解析等過程，生產(chǎn)過程繁瑣，使用微孔濾膜和超濾膜后，減少了這些繁瑣的生產(chǎn)過程，極大的縮短了生產(chǎn)周期。

故而，本發(fā)明的有益效果在于：(1)通過該方法，可以達(dá)到最大限度的分離、純化作用，有效除雜，枇杷葉提取物中熊果酸的純度提高，提取率提高25％以上，使有效成分得到富集，藥效得以提高；(2)采用本發(fā)明方法，提高除雜效率，減少多次吸附、解析的過程，簡化生產(chǎn)工序，大大降低了生產(chǎn)成本，其技術(shù)合理、操作安全、環(huán)境友好，利于產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。

下面將結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說明。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：本發(fā)明所述從枇杷葉中提取熊果酸的方法，包括以下步驟：