[發(fā)明專利]一種發(fā)酵種子液的制備方法及豆粕發(fā)酵方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410164296.0
• 申請日: 2014-04-23
• 公開（公告）號: CN105087409A
• 公開（公告）日: 2015-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 柴丹;吳學智;宋鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 豐益(上海）生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/00;A23K1/14;C12R1/125
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 王潔

1.一種制備枯草芽孢桿菌B3發(fā)酵種子液的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)將枯草芽孢桿菌B3種子液接種至無菌發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵培養(yǎng)至發(fā)酵液OD₆₀₀到達0.8-1.0；

(2-1)進行流加培養(yǎng)，優(yōu)選的，流加培養(yǎng)時發(fā)酵液的OD₆₀₀為0.8-1.0；或

(2-2)取出部分發(fā)酵種子液，以獲得枯草芽孢桿菌B3發(fā)酵種子液，向保留的種子液中補加無菌發(fā)酵培養(yǎng)基，并繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)至發(fā)酵液OD₆₀₀到達0.8-1.0，

(3)收集獲得枯草芽孢桿菌B3發(fā)酵種子液。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(3)前重復(fù)步驟(2-2)1-100次，優(yōu)選重復(fù)2-80次，更優(yōu)選重復(fù)10-50次。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述的種子液為將枯草芽孢桿菌B3于30℃-37℃，100-300rpm下培養(yǎng)14-16h獲得的，優(yōu)選的，所述的種子液為使用LB培養(yǎng)基和/或牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基獲得的。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的發(fā)酵培養(yǎng)為于30-37℃，通氣量3-4vvm，攪拌速度500-600rpm下培養(yǎng)。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2-1)中所述流加培養(yǎng)速度為200-500ml/min。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2-1)中所述的流加培養(yǎng)和/或步驟(2-2)中所述的發(fā)酵培養(yǎng)的通氣量為3-4vvm，攪拌速度500-600rpm。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2-2)中所述取出部分體積發(fā)酵種子液為取出發(fā)酵種子液的50％-99％體積，優(yōu)選取出50％-80％。

8.一種連續(xù)化生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的方法，其特征在于，將權(quán)利要求1方法制得的枯草芽孢桿菌B3發(fā)酵種子液接種至豆粕，進行發(fā)酵得發(fā)酵豆粕；

優(yōu)選的，所述方法還包括所述發(fā)酵豆粕經(jīng)干燥的步驟，更優(yōu)選的，所述方法還包括粉碎或制粒的步驟。

9.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述的接種為接種后豆粕中活細胞數(shù)達到(1-9)×10⁷cfu/g；所述的豆粕含水量為45-50％。

10.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述的發(fā)酵為固態(tài)發(fā)酵，優(yōu)選的，所述固態(tài)發(fā)酵于30-37℃下發(fā)酵24h-168h。