[發明專利]一種肉蓯蓉中毛蕊花糖苷的分離純化方法

有效

• 申請號: 201410146771.1
• 申請日: 2014-04-14
• 公開（公告）號: CN103896997A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 袁木榮;格日樂圖;張璐璐
• 申請（專利權）人: 青海伊納維康生物科技有限公司
• 主分類號: C07H15/18
• 分類號: C07H15/18;C07H1/08
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 孟旭;王為

一、技術領域

本發明涉及一種植物中有效成分的提取方法，特別涉及一種肉蓯蓉中毛蕊花糖苷的分離純化方法。

二、技術背景

肉蓯蓉有沙漠人參的美譽，是歷代中醫補腎壯陽的藥物。肉蓯蓉是寄生草本植物，新疆、內蒙古、甘肅、青海等地都有野生的肉蓯蓉生長，而且已經可以人工種植，該植物多寄生于生長在沙漠、沙地、沙丘、鹽堿地等地區的紅柳、梭梭的根部，藥用部位取未開花的埋在地下的肉質莖。《中國藥典》2010版收載的肉蓯蓉為列當科植物Cistanche?deserticola?Y.C.Ma和管花肉蓯蓉Cistanche?tubulosa(Schrenk)Wight干燥帶鱗葉的肉質莖。本草綱目曰：“肉蓯蓉氣溫、味干咸無毒，主五勞七傷，補中、除寒熱癰，養五臟，壯陽，益精氣”，“久服輕身，除膀胱邪氣腰痛，止痢，益髓，悅顏色，延年，大補壯陽”，《神農本草》將肉蓯蓉列為上品。現代科學研究表明，肉蓯蓉含有多糖、苯乙醇苷類、環烯醚萜苷類、木質素等化學成分，特別是苯乙醇苷中的毛蕊花糖苷具有治療慢性腎小球腎炎等多種醫藥用途，從肉蓯蓉中提取分離高含量的毛蕊花糖苷用于藥物開發具有重要意義。

國內已經申請的從肉蓯蓉中提取分離毛蕊花糖苷的專利有：1.中山大學等申請的《一種生產毛蕊花糖苷單體化合物的方法》，專利申請號為200910041647.8；2.中山大學等申請的《一種毛蕊花糖苷單體化合物的生產方法》，專利申請號為200910041641.0；3.中山大學等申請的《一種利用生物催化轉化生產毛蕊花糖苷的方法》，專利申請號為200910041559.8；4.《一種采用固定化酶生產毛蕊花糖苷的方法》，專利申請號為200910041643.X；5.《一種利用新鮮肉蓯蓉生產毛蕊花糖苷的方法》，專利申請號為200910041646.3；6.《一種新鮮肉蓯蓉經生物催化轉化生產毛蕊花糖苷的方法》，專利申請號為200910041649.7。以上專利中的制備方法都是要先通過β-葡萄糖苷酶經生物催化轉化的方法將肉蓯蓉中的松果菊苷轉化為毛蕊花糖苷，再用工業色譜法進行純化，不但制備工藝復雜，而且生物催化轉化用的催化劑β-葡萄糖苷酶價格昂貴，難以買到，不適合工業化大生產。我們開發的工藝只需將提取液直接上大孔樹脂或聚酰胺樹脂進行純化，含量就可以達到95%以上。

毛蕊花糖苷，英文名：Acteoside，分子結構式如下：

化學式：C29H36O15，分子量：624.59，CAS號:61276-17-3

三、發明內容

本發明的目的是提供一種從肉蓯蓉中分離純化毛蕊花糖苷的方法，該方法制備工藝簡單，產品含量高，成本低，適合于工業化生產。

本發明的制備方法包括以下步驟：

1）將肉蓯蓉切片；

2）用沸水或飽和蒸汽燙熟；

3）用乙醇提取，提取液濃縮除去乙醇，濃縮液加水稀釋，過濾；

4）濾液上大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂吸附，用乙醇洗脫，收集富含毛蕊花糖苷的洗脫液濃縮，干燥得毛蕊花糖苷粗品；

5）將粗品用水溶解，再上大孔吸附樹脂或聚酰胺樹脂吸附，乙醇洗脫，收集富含毛蕊花糖苷的洗脫液濃縮，干燥得毛蕊花糖苷精品。

其中，

步驟1）中所述的肉蓯蓉的切片厚度為1mm-20mm。

步驟2）中所述燙熟時間為1-60分鐘，優選10-30分鐘，如用蒸汽蒸30分鐘；

步驟3）所述乙醇提取是回流提取或超聲提取；提取次數為1-3次，提取時間為1-3小時，每次提取乙醇加入量為生藥重量的2-10倍（v/w）（舉例：1克生藥加入2-10ml的乙醇進行提取），所述乙醇濃度是0%-95%（v/v）；優選乙醇濃度是0%，80%，95%。所述加水量是濃縮液的2倍-25倍，優選10倍-25倍。

步驟4）所述大孔樹脂，型號選自：D101，AB-8，HPD100，HPD-200，HPD-200A,HPD-400，HPD-400A,HPD600，HPD750，優選大孔樹脂型號選自：D101，AB-8，HPD100，HPD200A，HPD400。所述聚酰胺樹脂，目數為：20目-200目；所述乙醇濃度是0%-95%（v/v）；優選乙醇濃度是30-60%。