[發明專利]汞離子膠體金比色檢測法及汞離子檢測試劑盒

無效

• 申請號: 201410146113.2
• 申請日: 2014-04-11
• 公開（公告）號: CN103901030A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 陳偉;鄧怡;潘道東;姚麗
• 申請（專利權）人: 合肥工業大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 南京利豐知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒

技術領域

本發明涉及一種Hg²⁺檢測方法，特別涉及一種快速檢測重金屬Hg²⁺的金標比色法，屬于生物化學技術領域。

技術背景

汞廣泛存在于自然界中，各種自然現象（雨、雪等）可以使汞在地表、大氣以及水中不斷循環，可為動植物吸收。食物鏈的生物放大作用下，它們成千百倍地富集，最后進入人體，使人產生重金屬中毒，輕則發生怪病(水俁病、骨痛病等)，重則導致死亡。隨著工業發展，大量的汞未經處理就被排放到了自然界，使得汞污染相當嚴重。

目前研究較多的重金屬Hg²⁺快速檢測方法主要有:?原子熒光光度法、電感藕合等離子體質譜分析技術、電感藕合等離體原子發射光譜、高效液相色譜法、酶抑制法、免疫分析法、比色法、試紙條法等。原子熒光光度法、電感藕合等離子體質譜分析技術、電感藕合等離體原子發射光譜、高效液相色譜法、酶抑制法、免疫分析法，準確度和靈敏度都很高，但均需要用特定的儀器且需要檢測人員具備一定的專業知識，價格昂貴，操作繁瑣，難以普及。基于膠體金和核酸適配體的比色法，靈敏度尚可，選擇性好簡便而在現場檢測中很有優勢。但此方法需要對金納米粒子進行表面修飾，操作復雜，且核酸失陪體亦較難制取，成本高昂。

發明內容

鑒于現有技術中的不足，本發明的一個目的在于提供一種汞離子檢測試劑盒，其包括檸檬酸鈉包裹的膠體金以及作為特異性識別分子的賴氨酸，并且，當將被檢測物質及識別分子加入所述膠體金時，若被檢測物質含有Hg²⁺，則所述膠體金的紫外吸收峰將發生紅移。

本發明的另一目的在于提供一種汞離子膠體金比色檢測法，其包括：提供檸檬酸鈉包裹的膠體金，并加入被檢測物質以及作為識別分子的賴氨酸，當被檢測物質包含Hg²⁺時則所述膠體金的紫外吸收峰發生紅移，從而實現Hg²⁺的檢測。

進一步的，當將被檢測物質及識別分子加入所述膠體金時，若被檢測物質含有Hg²⁺，則所述膠體金的顏色將從紅色變成紫色或灰色。

進一步的，該檢測法還可包括：取一系列含有不同濃度Hg²⁺的標準樣品與賴氨酸分別加入所述膠體金形成一系列不同的混合反應體系，再分別測量各混合反應體系從200?nm到850?nm的紫外光譜圖，并根據A₇₀₀/A₅₂₀的比值繪出標準曲線。?

本發明通過在檸檬酸鈉包裹的膠體金上靜電吸附Hg²⁺，當加入識別分子賴氨酸后，由于賴氨酸兩端都有-NH₂，從而可以特異性識別Hg²⁺形成N-Hg-N結構，使得膠體金從分散狀態變成聚集狀態，顏色也從紅色變成紫色甚至灰色，而且膠體金的紫外吸收發生紅移。

與現有技術相比，本發明的優點包括：

1、本發明將納米顆粒比表面積大這一顯著特點應用于比色法，建立了可用于現場快速超靈敏檢測的金標比色的檢測方法，通過肉眼直接觀察實現目標檢測物的快速定性檢測。無需其他輔助儀器設備，檢測工作可在10-15分鐘內完成并得到檢測結果。

2、本發明中用到的重要試劑賴氨酸廉價易得，相比基于核酸探針的金標比色法可以極大地節省了成本，并且無需對金納米粒子進行表面修飾，方便快捷。

3、本發明還具有快速且靈敏度高，特異性強，穩定性好，成本低廉，操作使用方法簡單易于推廣應用。可應用于醫院、家庭、以及食品安全與檢驗檢疫的海關、機場等口岸等需要現場快速檢測機構。

附圖說明

圖1為實施例2中不同濃度Hg²⁺(0、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5?nM)的紫外-可見光譜圖。

圖2為根據圖1中A₇₀₀/A₅₂₀的比值繪制的標準曲線。

圖3為實施例3中不同種類離子(Ag⁺,?K⁺,?Ca²⁺,?Pb²⁺,?Ba²⁺,?Ni²⁺,?Zn²⁺,?Mg²⁺,?Al³⁺為100?nM;?Hg²⁺為1?nM)的紫外-可見光譜圖。

圖4為根據圖3中A₆₄₀/A₅₂₅的比值繪制的柱狀圖。

具體實施方式