[發(fā)明專利]重組雙功能融合蛋白及其制法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410136962.X
• 申請日: 2014-04-04
• 公開（公告）號: CN104974262B
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田文志
• 申請（專利權(quán)）人: 華博生物醫(yī)藥技術(shù)（上海）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/02;A61K38/17;A61K47/68;A61P35/00;A61P1/16
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 馬莉華;崔佳佳

本發(fā)明涉及重組雙功能融合蛋白及其制法和用途。具體地，本發(fā)明公開了一種融合蛋白，具有包括TGF?β受體膜外區(qū)的元件A、VEGFR1第二膜外區(qū)D2的元件B和免疫球蛋白元件C，三者串聯(lián)在一起。該蛋白可以同時(shí)與VEGF和TGF?β1兩種配體結(jié)合，并具有較好的結(jié)合活性，從而抑制配體的生物學(xué)活性。本發(fā)明還提供了重組雙功能融合蛋白在疾病治療中的作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及一種重組雙功能融合蛋白及其制法和用途。

背景技術(shù)

腫瘤、肝纖維化等疾病每年奪走幾千萬人的生命，造成數(shù)億美元的經(jīng)濟(jì)損失。細(xì)胞膜表面的TGF-β和VEGFR受體和相應(yīng)配體的結(jié)合，是此類疾病產(chǎn)生和發(fā)展的一類重要原因，因此開發(fā)相應(yīng)的蛋白配體藥物具有良好的應(yīng)用前景。

目前公知的蛋白藥包括生長因子、激素類蛋白、酶類蛋白、細(xì)胞因子、干擾素、促紅細(xì)胞生成素、以及融合蛋白等。除融合蛋白以外，其它蛋白藥均屬于均質(zhì)蛋白，即只含有一種蛋白成分。而現(xiàn)有的融合蛋白藥(如阿瓦斯汀Avastin、阿柏西普Aflibercept)由受體蛋白的膜外區(qū)與人IgG Fc段融合而成，雖然含有兩種或兩種以上蛋白成分，但仍然只發(fā)揮一種功能，即只能阻斷一種細(xì)胞膜內(nèi)源性受體與相應(yīng)配體的結(jié)合。

雖然基因重組雙功能融合蛋白已有報(bào)道，但其組成及所對應(yīng)的靶點(diǎn)各異。迄今為止可以同時(shí)與TGF-β1及VEGF結(jié)合、并同時(shí)阻斷這兩個(gè)靶點(diǎn)所誘導(dǎo)的生物學(xué)活性的雙功能融合蛋白藥物未有報(bào)道。因此，開發(fā)此類雙功能融合蛋白藥物對延長患者的生存時(shí)間、改善患者的生存質(zhì)量、降低死亡率具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種重組雙功能融合蛋白及其制法和用途。

本發(fā)明的第一方面，提供了一種融合蛋白，所述融合蛋白包括融合在一起的以下元件：

(i)任選的位于N端的信號肽；

(ii)第一蛋白元件；

(iii)第二蛋白元件；以及

(iv)與第一蛋白元件和/或第二蛋白元件連接的免疫球蛋白元件，

其中，所述信號肽可操作地連于由(ii)、(iii)和(iv)所構(gòu)成的融合元件；

并且第一蛋白元件為TGF-β受體膜外區(qū)蛋白元件；第二蛋白元件為包括血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體VEGFR1第二膜外區(qū)D2的蛋白元件。

在另一優(yōu)選例中，所述的“可操作地連于”指所述信號肽可引導(dǎo)所述融合元件的表達(dá)或跨膜轉(zhuǎn)移(定位)。

在另一優(yōu)選例中，所述的融合蛋白具有選自下組的結(jié)構(gòu)：

(1)式Ia或式Ib所述結(jié)構(gòu)：

D-A-B-C (Ia)，或

D-B-A-C (Ib)

(2)式II a或式II b所述結(jié)構(gòu)：

D-A-C-B (II a)，或

D-B-C-A (II b)

其中，

A為TGF-β受體膜外區(qū)蛋白元件；

B為包括血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體VEGFR1第二膜外區(qū)D2的蛋白元件；

C為免疫球蛋白元件；

D為任選的信號肽序列；

“-”表示連接上述元件的肽鍵或肽接頭。

在另一優(yōu)選例中，所述元件A選自下組：TβRI、TβRII、TβRIII。