[發明專利]微球菌谷氨酰胺合成酶基因、其編碼蛋白及其克隆方法無效
| 申請號： | 201410130428.8 | 申請日： | 2014-04-02 |
| 公開（公告）號： | CN103966241A | 公開（公告）日： | 2014-08-06 |
| 發明（設計）人： | 朱晨光;王菁;張貴敏;凌慧玲;唐遠平;梅冰;宋任濤 | 申請（專利權）人： | 上海大學 |
| 主分類號： | C12N15/52 | 分類號： | C12N15/52;C12N9/00;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205 | 代理人： | 陸聰明 |
| 地址： | 200444*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 球菌 谷氨酰胺 合成 基因 編碼 蛋白 及其 克隆 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種微球菌谷氨酰胺合成酶基因，其特征在于該基因的序列為SEQ ID NO.1所示的堿基序列。
2.一種根據權利要求1所述的基因編碼的蛋白，其特征在于該蛋白的序列為SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
3.一種重組表達載體，該重組載體含有根據權利要求1所述的基因。
4.一種宿主細胞，該宿主細胞含有根據權利要求3所述的重組載體。
5.一種克隆根據權利要求1所述的微球菌谷氨酰胺合成酶基因的方法，其特征在于該方法的具體步驟為：參考NCBI數據庫中的微球菌的谷氨酰胺合成酶基因序列，設計了引物，從河岸土壤微生物宏基因組DNA中PCR擴增得到谷氨酰胺合成酶基因；所述的引物為：Micoc1F: 5’-ATGTTCACCTCCCCCGCGGA-3’和Micoc1R: 5’-TCAGACCGAGTAGTAGAGCT-3’。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于所述的PCR擴增的條件為：94℃ 5分鐘；94℃ 50秒，55℃ 50秒，72℃ 1分30秒，25個循環；72℃ 8分鐘。
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