[發(fā)明專(zhuān)利]一種新型的含MAR核心片段的動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410129979.2
• 申請(qǐng)日: 2014-04-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104975009B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-10-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高宏海;張成海;張玉晶;朱玲巧
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 三生國(guó)健藥業(yè)（上海）股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種分離的重組表達(dá)載體的MAR核心片段，其核苷酸堿基序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一種重組哺乳動(dòng)物表達(dá)載體，所述載體含權(quán)利要求1所述的MAR核心片段。

3.權(quán)利要求2所述載體，其所述MAR核心片段插入啟動(dòng)子的上游及聚腺苷酸化位點(diǎn)的下游。

4.權(quán)利要求3所述載體，所述啟動(dòng)子為CMV、SV40或EF-1a啟動(dòng)子。

5.權(quán)利要求2-4任一所述載體，所述載體為pBudCE4.1、pDR1、pcDNA3.1(+)、pDHFF或pCHO 1.0，或者上述任一載體的改造載體。

6.權(quán)利要求5所述載體，其為pBudCE4.1改造的載體，所述載體核苷酸序列如SEQ IDNO：4所示。

7.權(quán)利要求2-4任一所述載體，其中所述載體包含一個(gè)或多個(gè)編碼一種或多種重組蛋白基因。

8.權(quán)利要求5所述載體，其中所述載體包含一個(gè)或多個(gè)編碼一種或多種重組蛋白基因。

9.權(quán)利要求6所述載體，其中所述載體包含一個(gè)或多個(gè)編碼一種或多種重組蛋白基因。

10.一種宿主細(xì)胞，其為哺乳動(dòng)物細(xì)胞，其包含權(quán)利要求7-9任一所述的載體。

11.權(quán)利要求10所述的細(xì)胞，選自：CHO細(xì)胞、COS細(xì)胞、Vero細(xì)胞、SP2/0細(xì)胞、NS/0骨髓瘤細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、BHK細(xì)胞、Hela細(xì)胞、人類(lèi)B細(xì)胞、CV-1/EBNA細(xì)胞、L細(xì)胞、3T3細(xì)胞、HEPG2細(xì)胞、PerC6細(xì)胞或MDCK細(xì)胞。

12.一種制備重組蛋白的方法，所述方法包括在權(quán)利要求10或11所述的宿主細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄和翻譯存在于上述權(quán)利要求7-9任一所述表達(dá)載體上的一個(gè)或多個(gè)編碼所述重組蛋白的基因。