[發明專利]基于多肽的黑色素瘤生物標記物的檢測方法無效
| 申請號: | 201410117664.6 | 申請日: | 2014-03-25 |
| 公開(公告)號: | CN104020194A | 公開(公告)日: | 2014-09-03 |
| 發明(設計)人: | 殷詠梅;李根喜;王曉盈;仇金榮 | 申請(專利權)人: | 殷詠梅 |
| 主分類號: | G01N27/26 | 分類號: | G01N27/26 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 210000 江蘇省南*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基于 多肽 黑色素瘤 生物 標記 檢測 方法 | ||
1.一種基于多肽的黑色素瘤生物標記物的檢測方法,其特征在于,其包括以下步驟:
步驟一,金電極的預處理,3mm直徑的金電極依次經P3000、P5000的碳化硅砂紙打磨,1μm、0.3μm的氧化鋁粉拋光,無水乙醇和雙蒸水各5min的超聲清洗;隨后將電極浸泡在水虎魚溶液5min及50%的硝酸30min;最后由0.5M的硫酸電化學激活金電極;經上述處理的金電極首先與50μL信號肽溶液4℃條件下孵育16小時,隨后室溫條件下將電極浸泡在100μMMNH溶液3小時占位,以阻斷電極表面的非特異性吸附;
步驟二,將預處理的金電極與不同濃度的黑色素瘤生物標記物S100B或生物學樣本30℃溫育2.5小時;同時將2.5μM信號肽溶液與氯化銅30℃條件下按濃度比1∶1溫育以形成信號肽-銅離子復合物;與靶蛋白或生物學樣本溫育后的金電極經雙蒸水沖洗,隨后與信號肽-銅離子復合物溶液30℃條件下溫育2.5小時,隨后即可記錄下銅離子的輸出信號。
2.如權利要求1所述的基于多肽的黑色素瘤生物標記物的檢測方法,其特征在于,所述金電極浸在1ml含有過量鄰苯二胺和1ul?HCL的底物溶液中50℃水浴30min;之后即可在底物反應溶液中記錄下具電化學活性的磷酸二銨的輸出信號。
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