[發(fā)明專利]一種有活性的金魚Tgf2轉(zhuǎn)座子重組轉(zhuǎn)座酶蛋白的表達(dá)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410108974.1
• 申請日: 2014-03-24
• 公開（公告）號: CN103981204A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄒曙明;蔣霞云;徐海麗;侯飛;程洛單;沈曉丹;鄧壽長
• 申請（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N15/70
• 分類號: C12N15/70;C12N1/21;C12N9/12
• 代理公司: 上海卓陽知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31262
• 代理人: 金重慶

1.一種金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)質(zhì)粒，其特征在于，所述的表達(dá)質(zhì)粒是通過以下方法構(gòu)建的：將SEQ?ID?NO.5所示的核苷酸序列插入到pET-28a的BamHI?和?XhoI位點之間。

2.一種金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)菌株，其特征在于，所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)菌株是大腸桿菌Rosetta?1(DE3)且轉(zhuǎn)化有權(quán)利要求1所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)質(zhì)粒。

3.一種金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)方法，其特征在于，包括以下步驟：培養(yǎng)權(quán)利要求2所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)菌株至菌液在OD₆₀₀下的吸光度達(dá)到0.3-0.4，加入IPTG，在21-22℃下150-200rpm震蕩培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)方法，其特征在于，包括以下步驟：培養(yǎng)權(quán)利要求2所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)菌株至菌液在OD₆₀₀下的吸光度達(dá)到0.35，加入IPTG，在22℃下150-200rpm震蕩培養(yǎng)。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)時間為4-6小時。

6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的金魚gfTP1轉(zhuǎn)座酶蛋白表達(dá)方法，其特征在于，所述的IPTG在培養(yǎng)液中的濃度為0.6-1.0mM。