[發明專利]稻啟動子

無效

• 申請號: 201410106335.1
• 申請日: 2004-02-04
• 公開（公告）號: CN104031918A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: Y·哈茨費爾特;W·布羅克特
• 申請（專利權）人: 作物培植股份有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/84;C12N1/21;C12N5/10;A01H5/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 李程達

本申請是申請日為2004年2月4日、申請號為201210062389.3、發明名稱為“稻啟動子”的發明專利申請的分案申請。

本發明涉及植物分子生物學領域，更具體地涉及驅動和/或調節植物中有效連接的核酸表達的核酸序列。公開了該核酸序列從稻的分離，以及其在驅動和/或調節有效連接的核酸表達中的用途。本發明因此涉及啟動子、雜合啟動子、遺傳構建體、表達盒、轉化載體、表達載體、宿主細胞和包含根據本發明的分離核酸的轉基因植物。本發明還涉及用于驅動和/或調節核酸表達的方法以及用于轉基因植物生產的方法。

基因表達取決于轉錄起始，其通過轉錄起始復合物介導。基因表達還取決于轉錄的調節，其確定多強、何時以及在何處基因得到表達。所述基因表達的調節可通過轉錄調控元件介導，其通常嵌入核酸序列5'-側或表達基因的上游。上游核酸區域因為其啟動轉錄起始復合物的結合、形成和/或活化而通常稱為“啟動子”，并且因此能夠驅動和/或調節其3’下游核酸序列的表達。

為獲得有用的植物表型的植物遺傳工程通常包括異源基因的表達，其一般通過能驅動和/或調節有效連接的異源核酸表達的啟動子介導。宿主植物的表型不僅取決于異源核酸的貢獻，還取決于確定如何、在何處以及何時異源核酸得到表達的所選啟動子特異表達模式的貢獻。因此，具有合適表達模式的啟動子的選擇對于獲得合適的表型是至關重要的。本領域技術人員將需要有效的不同啟動子，以確定針對特定核酸的最優啟動子。對于許多不同的宿主植物，該有效性是相當有限的而因此還是需要提供具有各種表達特點的新啟動子。

SEQ?ID?NO1至22表示的核酸從稻（Oryza?Sativa）分離且已發現能驅動和調節有效連接的核酸的表達；其表達模式也已被表征。因此本發明提供許多尚未知的分離核酸，其可用作啟動子。

據此，本發明提供能驅動和/或調節表達的分離啟動子，包括：

（a）SEQ?ID?NO1至22任一所示的分離核酸或與SEQ?ID?NO1至22任一互補的分離核酸；或

（b）與SEQ?ID?NO1至22任一所示的DNA序列具有至少90%序列同一性的分離核酸；或

（c）與SEQ?ID?NO1至22任一所示的DNA序列在嚴謹條件下特異性雜交的分離核酸；或

（d）（a）至（c）中任一項定義的分離核酸，其通過插入序列而間隔；或

（e）（a）至（d）中定義的任一核酸的片段，其能驅動和/或調節表達。

如此處使用的術語“分離的”指從其原始來源中移出。優選地，“分離的”啟動子不含那些啟動子來源的生物體基因組DNA中天然位于啟動子側翼的序列（如蛋白質編碼序列或位于3’末端的其他序列）。更優選地，“分離的”啟動子也不含那些天然側接于其5’末端的序列。更優選地，“分離的”啟動子包括啟動子來源的生物體基因組DNA中與該啟動子天然在一起的少于5kb、4kb、3kb、2kb、1.5kb、1.2kb、1kb、0.8kb、0.5kb或0.1kb的核苷酸序列。

本發明并不限于由SEQ?ID?NO1至22表示的核酸。本領域技術人員將認識到可以存在維持同樣功能的核酸的變體或片段。這些變體或片段可以是人工的（例如，通過遺傳工程）或甚至可以是自然界存在的。因此本發明涉及SEQ?ID?NO1至22任一的變體核酸及片段，其在本發明方法中是有用的。上述變體及片段包含：

（a）SEQ?ID?NO1至22中任一所示的分離核酸或與SEQ?ID?NO1至22任一互補的分離核酸；或

（b）與SEQ?ID?NO1至22任一所示的DNA序列具有至少90%序列同一性的分離核酸；或

（c）與SEQ?ID?NO1至22任一所示的DNA序列在嚴謹條件下特異性雜交的分離核酸；或

（d）（a）至（c）任一中定義的分離核酸，其通過插入序列而間斷；或

（e）（a）至（d）中定義的任一核酸的片段，其能驅動和/或調節表達。

SEQ?ID?NO1至22任一的合適變體包含與SEQ?ID?NO1至22所示任一核酸具有遞增的優選至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%序列同一性的同源物。