[發(fā)明專利]口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410092728.1
• 申請日: 2014-03-13
• 公開（公告）號: CN103864906B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖進;齊鵬;董春娜;王楠;趙洪濤;張蕾;張欣;張艷賓;張君;李鳳鳴;鄭應(yīng)華
• 申請（專利權(quán)）人: 中牧實業(yè)股份有限公司
• 主分類號: C07K14/09
• 分類號: C07K14/09;G01N33/68;G01N33/569
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11245
• 代理人: 關(guān)暢,王慧鳳

1.一種多肽，為序列表中序列1所示。

2.一種口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒，包括口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3B抗原表位多肽包被的酶聯(lián)反應(yīng)板和酶標記抗抗體；所述口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3B抗原表位多肽為序列表中序列1所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述酶標記抗抗體的標記酶為辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶；所述酶標記抗抗體為酶標記兔抗豬IgG，所述酶標記抗抗體優(yōu)選為辣根過氧化物酶標記的兔抗豬IgG多克隆抗體。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述酶聯(lián)反應(yīng)板為可拆卸96孔酶標板；所述口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3B抗原表位多肽為化學人工合成得到。

5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的試劑盒，其特征在于：所述口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3B抗原表位多肽包被的酶聯(lián)反應(yīng)板的獲得方法是將所述口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3B抗原表位多肽溶于100μl的pH9.4的碳酸鹽溶液，然后加到96孔聚苯乙烯酶聯(lián)反應(yīng)板，每孔50ng抗原，在37℃放置2-4小時，再4-8℃下放置8-12小時使多肽抗原與酶聯(lián)反應(yīng)板充分結(jié)合，然后按照300μl/孔加入含有1g/100ml牛血清白蛋白pH7.4的PBS緩沖液，37℃封閉處理1-2小時，洗滌后甩干，待酶聯(lián)反應(yīng)板干燥后4℃密封保存。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒中還含有顯色液和終止液；當標記酶為辣根過氧化物酶時顯色液由顯色液A液和顯色液B液組成，所述顯色液A液為含0.2g/100ml過氧化氫尿素的檸檬酸磷酸鹽緩沖液，所述顯色液B液為0.2mg/ml的四甲基聯(lián)苯胺溶液；當標記酶為堿性磷酸酶時，顯色液為4-硝基酚磷酸鹽緩沖液；所述終止液為2mol/L的硫酸溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括陰性對照血清、陽性對照血清；所述陰性對照血清為無口蹄疫抗體的正常豬血清；所述陽性對照血清為以所述口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP1抗原表位多肽為免疫原免疫豬得到的血清。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括樣品稀釋液和濃縮洗滌液；樣品稀釋液為含有3g/100mlBSA的0.15M、PH為7.4的PBS緩沖液；所述濃縮洗滌液為0.15M，pH7.4，含有體積百分含量為0.5％的Tween-20的磷酸鹽緩沖液。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8中任意一項所述的試劑盒，其特征在于：所述口蹄疫病毒為豬O型口蹄疫病毒；具體可為豬口蹄疫OR/80病毒。

10.權(quán)利要求1所述的多肽或者權(quán)利要求2-9的試劑盒在制備檢測是否感染動物口蹄疫病毒病的試劑盒中的應(yīng)用；其中，動物口蹄疫病毒病為豬口蹄疫病毒?。痪唧w為豬O型口蹄疫病毒引起的豬口蹄疫病毒??；更具體為豬口蹄疫OR/80病毒引起的豬口蹄疫病毒病。