[發明專利]保存脫氧核糖核酸的方法

在審

• 申請號: 201410088995.1
• 申請日: 2014-03-12
• 公開（公告）號: CN104673781A
• 公開（公告）日: 2015-06-03
• 發明（設計）人: 施惠馨;林詠翔;關淑君;黃雪茵;蔡岳穎
• 申請（專利權）人: 大江基因醫學股份有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 姚亮

技術領域

本發明是關于一種保存脫氧核糖核酸的方法，尤指一種將包含有脫氧核糖核酸的基因采集棒置于保存瓶以延長脫氧核糖核酸的保存時間的方法。

背景技術

常見的基因采集方式是以采集棒采集受試者的脫氧核糖核酸(DNA)后，再將沾有受試者脫氧核糖核酸的采集棒放進空的保存瓶或帶有干燥劑的保存瓶。

由于在運輸過程中，沾有受試者組織的采集棒會碰撞瓶身而影響采集濃度，且以干燥方式保存脫氧核糖核酸會使脫氧核糖核酸降解(degradation)而影響后續檢測的準確性。

此外，采集棒與所采集樣品之間的親和性，會影響溶解于后續處理溶液中的脫氧核糖核酸含量。例如，當樣品附著于采集棒的附著力大于樣品與后續處理溶液之間的作用力，將使得大量的樣品殘存于采集棒上；又如采集棒本身的材質與后續處理溶液所存特定化學官能基甚或會影響樣品的降解程度，進而影響樣品中脫氧核糖核酸的質量。因此，本技術領域中實有穩定保存由受試者采取的脫氧核糖核酸的技術需求。

發明內容

鑒于現有技術保存脫氧核糖核酸的方法容易使脫氧核糖核酸降解而影響后續檢測的準確性等缺點，故本發明的目的在于提供一種保存以物理性方法采取的樣品所含的脫氧核糖核酸的方法，其是通過適當的采集棒與緩沖液的選擇性適用以延長脫氧核糖核酸的保存時間，進以提高檢測的準確性。

為達上述目的，本發明提供一種保存脫氧核糖核酸的方法，其包括：

齊備一具有平滑表面的采集部的采集棒，其中采集部上沾取有受試者的脫氧核糖核酸；

將該采集棒置于一含有緩沖液的保存瓶以延長脫氧核糖核酸的保存時間，其中該緩沖液含有濃度為20毫摩爾濃度(mM)至60mM的乙二胺四乙酸(ethylenediamine?tetraacetic?acid,EDTA)。

依據本發明，“平滑表面”如此處所指是在微觀下，該采集棒的采集部為具有多孔性材質所制成。較佳的，所述采集棒的采集部是由熱可塑性塑料(thermoplastic)經發泡(foaming)工藝所形成，其中熱可塑性塑料選自于由尼龍(nylon)、聚乙烯(polyethylene,PE)、聚丙烯(polypropylene,PP)、聚氨基甲酸酯(polyurethane,PU)、聚苯乙烯(polystyrene,PS)、聚酯類(polyesters)及其組合所組成的群組。更優選地，所述采集部為發泡尼龍所制成。

更佳的，所述采集棒的采集部呈圓柱狀、圓錐狀、水滴狀或具有一球狀面。

較佳的，所述緩沖液還包含選自于由氯化鈉(NaCl)、三羥甲基氨基甲烷-鹽酸[2-amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol?hydrochloride,Tris-HCl]及十二烷基硫酸鈉(sodium?dodecyl?sulfate)所組成的群組的物質。

更佳的，所述緩沖液中，以緩沖液的總濃度為基礎，氯化鈉的濃度為20mM至150mM，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸是弱堿性，且濃度為10mM至60mM；并以緩沖液的總體積為基礎，十二烷基硫酸鈉的濃度為0.1w/v%至10w/v%。

較佳的，所述緩沖液包括，但不限于胍異硫氰酸溶液(guanidine?isothiocyanate?solution,GIT?solution)、胍硫氰酸鹽溶液(guanidine?thiocyanate?solution,GT?solution)、GST溶液(GST?solution)(購自于geneaid公司)。

本發明的保存脫氧核糖核酸的方法，是通過特定濃度范圍的乙二胺四乙酸以避免脫氧核糖核酸降解；且由于采集部的材質于微觀是由多孔性材質致密組成的平滑表面，不但可提高采集部的表面積進以獲取較多受試者的脫氧核糖核酸，亦可方便采集并可降低受試者的不適感；此外，更可通過緩沖液中成分降低樣品附著于采集棒的附著力，使得較多量的樣品可由采集棒分離而進入緩沖液中，進而提升后續處理所獲得的脫氧核糖核酸的濃度。

附圖說明

圖1是本發明實施例1的分別以尼龍刷及發泡尼龍拭子采集受試者樣本后，于室溫放置2天的樣本1的脫氧核糖核酸瓊膠電泳圖。

圖2是本發明實施例1的分別以尼龍刷及發泡尼龍拭子采集受試者樣本后，于低溫放置4天的樣本2的脫氧核糖核酸瓊膠電泳圖。

圖3是本發明實施例1的分別以尼龍刷及發泡尼龍拭子采集受試者樣本后，于室溫放置8天的樣本3的脫氧核糖核酸瓊膠電泳圖。

具體實施方式