[發(fā)明專利]一種甲基桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410084284.7
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103834595A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馬愛軍;何任紅;張小華
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A62D3/02;C12R1/01;A62D101/04;A62D101/28
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王云

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種甲基桿菌(Methylobacterium?sp.)YCA-02及其在乙草胺降解中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

乙草胺是美國孟山都公司1971年開發(fā)的一種新型酰胺類除草劑，作為該類除草劑早期開發(fā)的品種，乙草胺占酰胺類除草劑當(dāng)前銷售量的最大份額，是目前世界上最重要的除草劑品種之一，也是目前我國使用量僅次于草甘磷的第二大類除草劑。可廣泛用于玉米、水稻、甘蔗、花生、棉花、大豆、煙草、蔬菜等農(nóng)作物芽前土壤處理和防除田間牛筋草、稗草、冤絲子、馬唐、狗尾草、秋棱、馬齒覓、臂形草、黎、鴨拓草、覓、紫香附子禾本科雜草和部分小粒種子的闊葉雜草。

進入環(huán)境的乙草胺及其代謝產(chǎn)物通過食物鏈在生物體內(nèi)不斷富集，可能會給哺乳動物、食草鳥類及水生生物帶來不育、癌癥和遺傳病等嚴(yán)重的健康問題和環(huán)境問題。目前，國內(nèi)外有關(guān)乙草胺在環(huán)境中降解動態(tài)方面的研究不多，而生物修復(fù)技術(shù)因微生物本身能對各類不同的有機污染物進行降解和轉(zhuǎn)化而具有巨大的潛力。因此，從自然環(huán)境中篩選得到能夠去除乙草胺的有效菌種具有重大的意義。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的第一目的在于提供一種對乙草胺具有降解作用的甲基桿菌。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種甲基桿菌在乙草胺降解中的應(yīng)用。

技術(shù)方案：為了解決上述第一目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：一種甲基桿菌，其分類命名為甲基桿菌(Methylobacterium?sp.)YCA-02，保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC），保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵政編碼為100101，保藏編號為：CGMCC?No.8389，保藏日期為2013年10月24日。

為了解決上述的第二目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：所述甲基桿菌在乙草胺降解中的應(yīng)用。

具體應(yīng)用為：

（1）將降解乙草胺殘留的甲基桿菌YCA-02的試管種接種于LB培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；

（2）將步驟（1）培養(yǎng)好的菌種按10％的接種量接種入500L的種子罐，無菌空氣的通氣量為1:0.6-1:1.2，攪拌速度為180-240r/min，培養(yǎng)溫度為30-35℃，培養(yǎng)時間為60h，培養(yǎng)至對數(shù)生長期，得到種子液；

（3）將步驟（2）所得到種子液按10％的接種量接入生產(chǎn)罐進行發(fā)酵培養(yǎng)，生產(chǎn)罐所用培養(yǎng)基與種子罐培養(yǎng)基相同，無菌空氣的通氣量為1:0.6-1:1.2，攪拌速度為180-240r/min，培養(yǎng)溫度為30-35℃，培養(yǎng)時間為60h，發(fā)酵完成后的培養(yǎng)液即為應(yīng)用于乙草胺降解中的甲基桿菌。

更進一步的，所述步驟（1）中LB培養(yǎng)基的配方為：1000mL蒸餾水，酵母粉5.0g，蛋白胨10.0g，氯化鈉10.0g，pH7.0。

更進一步的，所述步驟（2）中種子罐所用培養(yǎng)基的配方為：葡萄糖0.8%，（NH₄）₂SO₄1%，K₂HPO₄0.2%，MgSO₄0.05%，NaCl0.01%，CaCO₃0.3%，酵母膏0.02%，pH值7.2-7.5。

本發(fā)明中所述的甲基桿菌(Methylobacterium?sp.)YCA-02的生理活性特征如下：

所述甲基桿菌(Methylobacterium?sp.)YCA-02主要生物學(xué)特性為G-，無芽孢，無鞭毛，卵圓形，LB培養(yǎng)基上菌落成圓形，突起，邊緣整齊，干燥，不透明，接觸酶陽性，不能水解淀粉。

有益效果：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點是：

（1）本發(fā)明公開的一種甲基桿菌(Methylobacterium?sp.)YCA-02具有較廣的降解譜，能使土壤中乙草胺的殘留量降低90％以上，可在農(nóng)作物的生長過程中正常使用化學(xué)農(nóng)藥進行病蟲害防治的同時保證農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留含量符合綠色食品要求；適合在全國糧油蔬菜生產(chǎn)出口基地或有綠色食品商標(biāo)標(biāo)志的地方大面積推廣使用。本發(fā)明對于保護生態(tài)環(huán)境，保護人類的身體健康，提高農(nóng)產(chǎn)品的附加值具有重要的意義。本發(fā)明成功地解決了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中農(nóng)藥殘留超標(biāo)和除草劑藥害問題，既充分發(fā)揮了化學(xué)農(nóng)藥在植物病蟲草害防治中的高效快速的作用，又可以生產(chǎn)出無毒無公害的綠色農(nóng)產(chǎn)品。