[發明專利]一種雞艾美耳球蟲卵囊分離純化的工業化生產方法

無效

• 申請號: 201410082352.6
• 申請日: 2014-03-07
• 公開（公告）號: CN103881913A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 吳彩艷;孫銘飛;戚南山;廖申權;呂敏娜;李娟;謝明權;溫列娜
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院動物衛生研究所
• 主分類號: C12N1/10
• 分類號: C12N1/10;C12R1/90
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

1.一種雞艾美耳球蟲卵囊分離純化的工業化生產方法，包括如下步驟：

（1）糞樣處理：收集雞感染球蟲后第120～192h的糞便，加水重懸糞便，浸泡1～3h后，通過自流方式，使糞便混合液利用自身壓力差，壓入碟片分離機，離心收集沉淀；

（2）經過碟片離心機后的上清再次利用蠕動泵經過管式離心機，離心收集沉淀；

（3）將兩次離心的沉淀混合，向沉淀中加入2～4倍體積的飽和鹽水，通過自流方式，使糞便混合液利用自身壓力差，壓入碟片分離機，離心收集上清；

（4）上清中加入3～5倍飽和鹽水體積的水，碟片離心機離心，收集沉淀，沉淀即為卵囊，用水洗滌后，沉淀用重鉻酸鉀溶液重懸，置25～30℃，待卵囊孢子化率達到80～90%后，收集卵囊，再通過碟片離心機棄重鉻酸鉀溶液；

（5）以水重懸洗滌卵囊，然后以次氯酸鈉溶液重懸卵囊，管式離心機離心，離心沉淀物即為純化的孢子化卵囊，再次以水重懸洗滌，除去次氯酸鈉溶液，然后以重鉻酸鉀溶液重懸孢子化卵囊低溫保存備用。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）加入水的量為糞便的5～15倍體積。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在與，所述重鉻酸鉀溶液的濃度為2.5%，按質量百分比計。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（5）所述次氯酸鈉溶液的濃度為20～30%，按質量百分比計。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述次氯酸鈉溶液的濃度為25%，按質量百分比計。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（4）和步驟（5）所述低溫保存是在置于4℃保存。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）、步驟（2）、步驟（4）和步驟（5）的離心條件為2500～3500g/min，離心8～12min。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）碟片分離機的離心條件為1500～2500g/min，離心8～12min。