[發明專利]一種人血白蛋白的生產方法

在審

• 申請號: 201410078075.1
• 申請日: 2014-03-05
• 公開（公告）號: CN103833844A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發明（設計）人: 孔維權;張庭喜;王連群;石正國;朱瑞芳;張帆;侯彩霞;呂紹玉
• 申請（專利權）人: 貴州中泰生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/34
• 代理公司: 東莞市中正知識產權事務所 44231
• 代理人: 劉林

技術領域

本發明涉及一種血液制品生產的工藝，具體是一種人血白蛋白的生產方法。

背景技術

國內血液制品生產的主要工藝是Cohn低溫乙醇分步分離工藝。該工藝自初創以來，已經有70多年的歷史了。70多年間，在生產和研究中有著不同的改進，雖然都是通過控制乙醇濃度、分離的溫度、pH、蛋白質濃度、離子強度等五大要素進行血漿蛋白質的分離，但現有專利技術存在白蛋白得率低、原料利用率較低的局限。

發明內容

為克服上述缺陷，本發明提出一種4步法分離生產人血白蛋白的方法，增加了Cohn組分Ⅳ-1、Cohn組分Ⅳ-4的分離，為提高原料的利用率提供了工業化生產的條件。

該方法的基本原理為血漿蛋白Cohn低溫乙醇分步分離。本發明所述的人血白蛋白的生產包括一下步驟：

1、四步法蛋白質分離工藝：

本步驟為以下4步，分別為：第一步分離Cohn組分I、組分Ⅱ、組分Ⅲ；第二步分離Cohn組分Ⅳ-1；第三步分離Cohn組分Ⅳ-4；第四步分離Cohn組分V,組分V沉淀經純化過濾即得人血白蛋白。

2、超濾生產：

超濾的目的在于濃縮制品，通過超濾透析去除小分子物質，也包括組分分離過程中高達40%以上的乙醇，超濾選擇的超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為：等體積的無菌生理鹽水透析2至6次，等體積的注射用水透析2至5次，超濾透析的溫度為0至10℃。

3、配制與巴氏病毒滅活：

按照既定的白蛋白成分配方配制完成后，進行58℃至62℃恒溫10小時（600分鐘）的巴氏病毒滅活。

4、灌裝與后加溫：

在產品灌裝-軋蓋操作完成后，對所有產品進行55至62℃，90至300分鐘的后加溫處理。

5、包裝檢驗：

經包裝檢驗即為人血白蛋白成品，檢驗標準為中國藥典最新的人血白蛋白標準，也可以參考歐洲藥典、美國藥典等進行成品檢驗。

所述的四步法蛋白質分離工藝的特點在于。

（1）、第一步分離（分離Cohn組分I、組分Ⅱ、組分Ⅲ）的工藝參數為：pH為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.0℃至-2.5℃，蛋白質濃度范圍為：4.0%至7.8%。

（2）、第二步分離（分離Cohn組分Ⅳ-1）的工藝參數為：pH為3.5至6.8、乙醇含量為12%至24%、溫度控制為-5.0℃至-2.5℃，蛋白質濃度范圍為：2.0%至5.8%。

（3）、第三步分離（分離Cohn組分Ⅳ-4）的工藝參數為：pH為4.5至6.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-6.0℃至-2.5℃，蛋白質濃度范圍為：1.0%至4.8%。

（4）、第四步分離（分離Cohn組分V）的工藝參數為：pH為3.5至5.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-10.0℃至-4.5℃，蛋白質濃度范圍為：0.6%至4.8%。

所述的超濾生產的特點在于：人血白蛋白生產工藝中采用超濾工序來濃縮人血白蛋白，超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為：等體積的無菌生理鹽水透析3至6次，等體積的注射用水透析3至6次，超濾透析的溫度為0至10℃。

所述的配制與巴氏病毒滅活的特點在于：采用兩步病毒處理措施，其中第一步為配制完成后采用10小時（600分鐘）的巴氏病毒滅活處理，第二步滅活為在灌裝軋蓋后進行55至62℃，90至300分鐘后加溫處理。

該法生產的人血白蛋白產品符合中國藥典的質量要求。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明作進一步描述。通過實施實例1說明本發明的技術方案及操作過程。

實施實例1：

1、四步法蛋白質分離工藝：

步驟為以下4步，分別為：第一步分離Cohn組分I、組分Ⅱ、組分Ⅲ；第二步分離Cohn組分Ⅳ-1；第三步分離Cohn組分Ⅳ-4；第四步分離Cohn組分V,組分V沉淀經純化過濾即得人血白蛋白。

（1A）、分離Cohn組分I+Ⅱ+Ⅲ：

工藝參數為：pH為7.0、乙醇含量為23%、溫度控制為-2.5℃，蛋白質濃度范圍為6.8%。

組分沉淀制作完畢，按照5克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉淀。壓濾液用于分離Cohn組分Ⅵ-1。

（1B）、分離Cohn組分Ⅵ-1：?

工藝參數為：pH為5.8、乙醇含量為18%、溫度控制為-3.2℃，蛋白質濃度范圍為：3.8%，