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[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶酵母菌株的篩選方法在審

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201410075528.5 申請日: 2014-03-04
公開(公告)號: CN104152361A 公開(公告)日: 2014-11-19
發(fā)明(設計)人: 陶永勝;彭傳濤 申請(專利權)人: 西北農(nóng)林科技大學
主分類號: C12N1/16 分類號: C12N1/16
代理公司: 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114 代理人: 韓翎
地址: 712100 陜西省西安市楊*** 國省代碼: 陜西;61
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 高產(chǎn) 葡萄 糖苷酶 酵母 菌株 篩選 方法
【權利要求書】:

1.一種高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶酵母菌株的篩選方法,其特征在于:所述的篩選方法包括以下操作步驟:(1)培養(yǎng)基的配制;(2)?非釀酒酵母菌的純化,得單菌落;(3)?單菌落的活化;(4)?在96孔板中添加培養(yǎng)基和活化后的單菌落;(5)?通過顏色篩選高產(chǎn)糖苷酶菌株。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶酵母菌株的篩選方法,其特征在于:

所述的步驟(1)培養(yǎng)基的配制:將重量百分比為0.3%的七葉苷,重量百分比為0.05%的檸檬酸鐵,重量百分比為0.2%的NaCl,重量百分比為0.05%的MgSO4.7H2O,重量百分比為0.1%的KH2PO4和重量百分比為2%的瓊脂加水混合后在121℃滅菌20min,得培養(yǎng)基;

所述的步驟(2)非釀酒酵母菌的純化:將非釀酒酵母菌先在WL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)5天,得單菌落;

所述的步驟(3)單菌落的活化:根據(jù)單菌落顏色、菌落大小、突起、邊緣及其形態(tài)的不同,分別挑取不同的單菌落,在添加YPD液體培養(yǎng)基的試管中活化,每只試管添加YPD液體培養(yǎng)基5mL,活化兩天;

所述的步驟(4)在96孔板中添加培養(yǎng)基和活化后的單菌落:在96孔板中,每孔添加250μl培養(yǎng)基;再添加經(jīng)活化后的單菌落15μl,每個活化后的單菌落添加兩個孔,與作為對照,同時涂布均勻,記錄好每個單菌落與96孔板相對應的編號;

所述的步驟(5)通過顏色篩選高產(chǎn)糖苷酶菌株:培養(yǎng)3天后,選擇呈現(xiàn)顏色深的棕黑色單菌落,得膠紅酵母和膜璞畢赤酵母,膠紅酵母和膜璞畢赤酵母均為高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶酵母菌株。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種高產(chǎn)β-葡萄糖苷酶酵母菌株的篩選方法,其特征在于:所述的非釀酒酵母菌為美極梅奇酵母、葡萄汁有孢漢遜酵母、東方伊薩酵母或假絲酵母。

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