[發(fā)明專利]一種煙草多糖硫酸酯的制備方法及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410074231.7
• 申請(qǐng)日: 2014-03-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103804508A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許春平;毛多斌;馬宇平;蘇東贏;司俊玲;荊曉燕;楊琛琛;孫斯文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;C09K15/12
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時(shí)立新

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于煙草提取物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種煙草多糖硫酸酯的制備方法及其用途。

背景技術(shù)

煙草為茄科煙草屬一年生或多年生植物，原產(chǎn)于南美洲，單葉互生，常有粘質(zhì)柔毛。

煙草是一種有爭(zhēng)議但有巨大經(jīng)濟(jì)效益的農(nóng)作物，也是世界上種植最廣泛的非糧食作物，煙草種植與產(chǎn)品加工在國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。我國(guó)引種煙草很早，產(chǎn)量頗大。到目前為止我國(guó)煙草的種植面積和產(chǎn)量均居世界首位。我國(guó)目前對(duì)于煙葉的研究?jī)H限于香煙的加工工藝，涉及到其他行業(yè)的研究報(bào)道卻很少。但由于煙葉中含有多種特殊天然植物素，如煙堿、果膠、纖維素、煙酸、茄尼醇，多糖等，所以在精細(xì)化工、日化、香精香料、食品、輕工、醫(yī)藥等行業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用，極具開(kāi)發(fā)潛質(zhì)。

多糖是一類由單糖聚合而成的高分子碳水化合物，一般認(rèn)為天然多糖具有較好的生物活性，具有較好的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、延緩衰老、抗感染等功能。

天熱多糖固然具有很多優(yōu)異性能，但由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性較差、功能不夠穩(wěn)定，因而常用化學(xué)改性方法來(lái)進(jìn)一步完善多糖功能。其中多糖酯化反應(yīng)是最常用，也是最具多樣性的多糖改性方法，根據(jù)化學(xué)修飾鍵位的不同，分為硫酸酯化、磷酸酯化或羧甲基化等，其中硫酸化修飾多糖是多糖結(jié)構(gòu)修飾的一個(gè)重要的研究方向。常用的多糖硫酸酯化方法包括氯磺酸一吡啶法、濃硫酸法、三氧化硫一吡啶法及Nagasawa等，具體選擇哪種方法修飾多糖，常需根據(jù)多糖主鏈糖單元的類型而定，一般的，吡喃型多糖采用氯磺酸一吡啶法，呋喃型多糖采用Nagasawa法。

隨著人們健康意識(shí)的提高，天然抗氧化劑在食品添加劑、營(yíng)養(yǎng)品、化妝品和醫(yī)藥領(lǐng)域得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，其中多糖硫酸酯也常被作為一種常用的抗氧化劑，在醫(yī)療保健、功能性飲料等領(lǐng)域有所應(yīng)用。同其他植物體一樣，煙草植物體中也含有大量的多糖，如果能夠合理利用煙草植物體中的多糖開(kāi)發(fā)新型的天然抗氧化劑，無(wú)疑具有巨大的經(jīng)濟(jì)與社會(huì)效益。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種煙草多糖硫酸酯的制備方法及其用途。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種煙草多糖硫酸酯的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

（1）提取煙草多糖，具體步驟包括：

A．將煙葉粉碎，過(guò)篩；優(yōu)選篩目為60目；

B．將步驟A粉碎后煙末與蒸餾水混合均勻，超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)粉碎；料液比按照質(zhì)量︰體積計(jì)，煙末︰蒸餾水=1︰20~30；優(yōu)選1︰25的比例，其中質(zhì)量單位為g，體積單位為mL；

C．將步驟B獲得的混合物進(jìn)行離心，取上清液；所述離心為4℃、10000?r/min條件下，離心10~20?min，優(yōu)選離心15min；

D．將步驟C所得上清液濃縮至原上清液體積的5%；所述濃縮上清液優(yōu)選70℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮；

E．將步驟D濃縮液醇析24~48h；所述醇析優(yōu)選4℃條件下，無(wú)水乙醇醇析24h；

F．將步驟E醇析后液體離心取沉淀；所述離心為4℃、10000?r/min條件下，離心10~20?min，優(yōu)選離心15min；

G．將步驟F所得沉淀物用蒸餾水溶解，用Sevage法脫蛋白、丙酮脫色后取水相溶液；

H．將步驟G所得水相溶液醇析24~48h后離心取沉淀，沉淀物干燥即得煙草多糖；所述醇析優(yōu)選4℃條件下，無(wú)水乙醇醇析24h；淀物干燥時(shí)優(yōu)選真空冷凍干燥；

（2）將步驟（1）提取的煙草多糖進(jìn)行硫酸酯化修飾；具體步驟包括：

I．將步驟（1）中制備的煙草多糖混溶于DMF中，攪拌混合成均勻的懸液；攪拌優(yōu)選采用磁力攪拌器攪拌，攪拌30min；

J．將步驟I制備的懸液倒入酯化試劑中，60~95℃條件下反應(yīng)2~4h，反應(yīng)結(jié)束后冷卻至室溫；優(yōu)選水浴條件下，80℃攪拌反應(yīng)3h；

K．將步驟J冷卻后的反應(yīng)液倒入0℃冷水中，NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.0；所述NaOH溶液優(yōu)選質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的NaOH溶液；

L．將步驟K調(diào)節(jié)pH值后的反應(yīng)液醇析24~48h，離心取沉淀物；所述醇析優(yōu)選加入三倍體積的無(wú)水乙醇醇析48h；所述離心為4℃、10000?r/min條件下，離心10~20?min，優(yōu)選離心15min；

M．將步驟L的沉淀物溶解，透析，透析結(jié)束后，冷凍干燥即得煙草多糖硫酸酯；所述溶解優(yōu)選60℃熱水溶解；所述透析優(yōu)選蒸餾水透析，透析時(shí)每8h換水一次，透析72h。

步驟J中，所述酯化試劑按下述方法制備：