[發(fā)明專利]葉酸-葡聚糖綴合物及其應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410060493.8
• 申請(qǐng)日: 2012-12-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103864955A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李軍;游紹進(jìn);陳瓊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州友林生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/02
• 分類號(hào): C08B37/02;A61K47/36;A61K31/337;A61P35/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是中國(guó)專利申請(qǐng)第201210543504.9號(hào)分案的發(fā)明，享有2012年12月14目的申請(qǐng)日。

本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體而言，本發(fā)明涉及葉酸-葡聚糖綴合物，該葉酸-葡聚糖綴合物能提升用其包裹的藥物化合物(如，紫杉醇)的理化性質(zhì)，甚至可以協(xié)同起效，并能提高藥物的耐受性。另外，本發(fā)明還涉及該葉酸-葡聚糖綴合物制備藥物組合物的應(yīng)用及其制備方法等。

背景技術(shù)

目前臨床使用的大多數(shù)抗癌藥物，如紫杉醇，Docetaxel(多西他賽)，阿霉素等在生理鹽水中的溶解度比較差，無(wú)法在臨床上直接使用，需要一些輔料配合。例如，用聚氧乙烯蓖麻油和乙醇的混合物來(lái)配制紫杉醇，(泰索帝)用聚山梨酯和乙醇來(lái)配制，但是都會(huì)引起強(qiáng)烈的副作用，如過(guò)敏反應(yīng)、腎臟毒性、神經(jīng)和心臟毒性等；最近的使用血清白蛋白為載體來(lái)配制紫杉醇，毒副作用也明顯降低，然而血清白蛋白無(wú)論是提取還是DNA重組獲得，純化難度大，造成成本居高不下，一個(gè)劑量就需US$5,100，而一個(gè)療程需要至少3劑，無(wú)法在我國(guó)推廣。

日本專利JP2010126533A披露了，把紫杉醇與葡聚糖等共價(jià)綴合在一起，然后再通過(guò)非共價(jià)吸附在藥物顆粒表面固定葉酸，以達(dá)到靶向抗腫瘤的目的，然而本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，紫杉醇作為藥效活性化合物，與葡聚糖綴合，尤其是與葡聚糖上大量基團(tuán)的副反應(yīng)，由于化學(xué)結(jié)構(gòu)的改變，會(huì)顯著降低紫杉醇的藥效，如果要消除結(jié)構(gòu)相近的副產(chǎn)物，需要復(fù)雜的純化過(guò)程(如層析過(guò)柱)，成本降不下來(lái)，而且葉酸吸附在表面，容易洗脫。中國(guó)專利20121002970.5公開(kāi)了共價(jià)結(jié)合的葉酸-葡聚糖-氧化鐵納米顆粒，其具有體外靶向作用，其沒(méi)有報(bào)道這種顆粒本身的抗腫瘤效果(實(shí)際基本沒(méi)有)，而且本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)其是先合成葡聚糖-氧化鐵納米顆粒，然后再進(jìn)行葉酸綴合，合成效率低，且輔料對(duì)藥物的適應(yīng)性喪失。

為此，本發(fā)明人經(jīng)過(guò)艱苦的研究，并結(jié)合一些運(yùn)氣，偶然發(fā)現(xiàn)通過(guò)一些連接基團(tuán)將葉酸直接共價(jià)結(jié)合到葡聚糖上，雖然一定程度上喪失了葉酸對(duì)腫瘤的靶向性，目前其經(jīng)測(cè)試體外沒(méi)有抗腫瘤細(xì)胞的毒性(活性)，但是卻能夠很穩(wěn)定地非共價(jià)地包裹住諸如紫杉醇等藥物，復(fù)溶性和穩(wěn)定性俱佳，且不必改變紫杉醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)，還無(wú)需使用復(fù)雜的純化工藝(如，柱層析)。更令人意想不到的是，該輔料本身雖然沒(méi)有體外抗腫瘤細(xì)胞的毒性，但是能夠協(xié)同紫杉醇起效，提高體內(nèi)的抗腫瘤的效果，并且能提高受試動(dòng)物的藥物耐受性，使得在臨床使用中可以更大劑量地給藥，從而進(jìn)一步提高抗腫瘤效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供新的葉酸-葡聚糖綴合物，該葉酸-葡聚糖綴合物包裹藥物的適應(yīng)性良好，無(wú)需復(fù)雜的純化工藝，包裹形成的藥物組合物復(fù)溶性和穩(wěn)定性俱佳，甚至可以與紫杉醇等協(xié)同起效，并能提高藥物的耐受性。另外，本發(fā)明還提供了該葉酸-葡聚糖綴合物制備藥物組合物的應(yīng)用及其制備方法等。

具體而言，在第I方面，本發(fā)明提供了葉酸-葡聚糖綴合物，其由如下制備方法制備而得，該方法包括，

(1)合成琥珀酰化葡聚糖；

(2)合成胺基化葉酸類似物，所述胺基化葉酸類似物是如下化合物

(3)用步驟(1)和步驟(2)的產(chǎn)物合成葉酸-葡聚糖綴合物。

優(yōu)選在本發(fā)明第I方面的葉酸-葡聚糖綴合物中，所述方法包括，

(1)按流程式I合成琥珀酰化葡聚糖

(2)按流程式II合成胺基化葉酸類似物

(3)按流程式III用步驟(1)和步驟(2)的產(chǎn)物合成葉酸-葡聚糖綴合物

更優(yōu)選在本發(fā)明第I方面的葉酸-葡聚糖綴合物中，所述方法包括，

(1)取平均分子量20KDa、Mw/Mn＝1.3的葡聚糖10.0g溶于無(wú)水DMF中，攪拌20分鐘形成澄清的溶液，然后加入1670mg琥珀酸酐和200.0mg4-二甲基氨基吡啶(DMAP)，快速攪拌至所有的固體溶解；置于室溫下使得整個(gè)反應(yīng)液反應(yīng)24小時(shí)，之后將反應(yīng)液放入截留分子量3,500的Spectra/Por3透析袋中，置于水中透析2天；然后將透析袋中的溶液冷凍干燥，得到白色的琥珀酰化葡聚糖；