[發(fā)明專利]一種澳洲堅(jiān)果新種質(zhì)創(chuàng)制方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410059471.X
• 申請(qǐng)日: 2014-02-21
• 公開（公告）號(hào): CN103798134A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柳覲;倪書邦;賀熙勇;孔廣紅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省熱帶作物科學(xué)研究所
• 主分類號(hào): A01H1/06
• 分類號(hào): A01H1/06
• 代理公司: 昆明今威專利商標(biāo)代理有限公司 53115
• 代理人: 趙云

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明涉及一種種質(zhì)創(chuàng)制方法，具體說(shuō)是一種通過(guò)⁶⁰Co-γ射線輻照澳洲堅(jiān)果萌動(dòng)種子來(lái)創(chuàng)制澳洲堅(jiān)果新種質(zhì)的方法。

技術(shù)背景

澳洲堅(jiān)果（Macadamia?spp.）是山龍眼科（Proteaceae）澳洲堅(jiān)果屬（Macadamia?F.Muell）常綠喬木，原產(chǎn)于澳大利亞昆士蘭州東南部和新南威爾士州北部沿海亞熱帶雨林中，19世紀(jì)后期引種到美國(guó)夏威夷，并在1948年后開始在夏威夷大規(guī)模商業(yè)性種植。我國(guó)自上個(gè)世紀(jì)70年代末開始澳洲堅(jiān)果的引種和試種，目前在云南、廣東、廣西、海南等熱區(qū)省份均有分布，但主要的商業(yè)化種植還是在云南。

由于國(guó)內(nèi)引種栽培澳洲堅(jiān)果的時(shí)間較短，目前生產(chǎn)上主要選用的是澳大利亞和夏威夷的育成品種，盡管研究者們近年來(lái)進(jìn)行了大量的品種比較試驗(yàn)和實(shí)生選種工作，也篩選出了一些相對(duì)適合我國(guó)熱區(qū)種植的國(guó)外品種，但其單位面積產(chǎn)量?jī)H有相應(yīng)品種在其國(guó)外原產(chǎn)地的1/3～1/2，嚴(yán)重影響了果農(nóng)種植澳洲堅(jiān)果的積極性，制約了我國(guó)澳洲堅(jiān)果產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。因此，選育出適合我國(guó)不同生境條件的澳洲堅(jiān)果品種迫在眉睫，而大量多樣化的種質(zhì)資源則是品種選育的基礎(chǔ)。由于我國(guó)不是澳洲堅(jiān)果的原產(chǎn)地，因此無(wú)法獲得一些優(yōu)異的野生種質(zhì)資源，幾乎所有新種質(zhì)的創(chuàng)制均需要依賴化學(xué)或物理的人工誘變手段。而萌動(dòng)種子由于其處于活躍的核酸復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)時(shí)期，相對(duì)處于休眠期的干種子，極易受外界誘變?cè)吹挠绊懓l(fā)生基因突變，產(chǎn)生新種質(zhì)。

⁶⁰Co-γ射線自上個(gè)世紀(jì)被應(yīng)用到植物誘變育種領(lǐng)域以來(lái)，已在眾多大宗作物及一些經(jīng)濟(jì)作物如果樹、蔬菜和花卉等的育種中應(yīng)用并取得了顯著成效，但由于澳洲堅(jiān)果特殊的結(jié)構(gòu)，將⁶⁰Co-γ射線輻照應(yīng)用于澳洲堅(jiān)果萌動(dòng)種子來(lái)進(jìn)行種質(zhì)創(chuàng)新的研究國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種澳洲堅(jiān)果新種質(zhì)的創(chuàng)制方法，它通過(guò)⁶⁰Co-γ射線輻照澳洲堅(jiān)果萌動(dòng)種子來(lái)創(chuàng)制新的澳洲堅(jiān)果種質(zhì)，其射線的輻照方式及劑量合理，可顯著縮短品種選育周期，經(jīng)濟(jì)效益較好。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

①采摘成熟的澳洲堅(jiān)果種子，人工脫皮后立刻播種于用多菌靈滅菌后的濕潤(rùn)沙床，每天灑水2次保持沙床濕度為75%～80%，3周后選取果殼開裂至1mm以上但芽點(diǎn)尚未突出果殼的種子；

②將裂殼將裂殼程度適宜的萌動(dòng)種子用劑量為10?Gy～130Gy的⁶⁰Co-γ射線輻照；

③輻照后的萌動(dòng)種子繼續(xù)播入用多菌靈滅菌后的濕潤(rùn)沙床，每天灑水2次保持沙床濕度為75%～80%，2～8周后種子萌發(fā)成幼苗，即獲得誘變苗，通過(guò)對(duì)發(fā)芽率的統(tǒng)計(jì)獲得新種質(zhì)創(chuàng)制的⁶⁰Co-γ射線輻照最適劑量和致死劑量；

④對(duì)萌發(fā)的幼苗的株高、莖粗、葉片畸變情況、株型畸變情況進(jìn)行觀測(cè)并與對(duì)照組比對(duì)，重點(diǎn)觀測(cè)經(jīng)半致死劑量至致死劑量間⁶⁰Co-γ射線輻照后誘變苗；

⑤找出有顯著形態(tài)變異的誘變苗作為新種質(zhì)定植于大田。

上述步驟①中選用的澳洲堅(jiān)果種子為新鮮的成熟種子。

上述步驟②中所用⁶⁰Co-γ射線劑量為40?Gy～100Gy，劑量率為10?Gy/h。

澳洲堅(jiān)果品種D4和A16萌動(dòng)種子的最佳輻照劑量在40?Gy～70?Gy，品種O.C和HAES900萌動(dòng)種子的最佳輻照劑量在70～100?Gy。

⁶⁰Co-γ射線應(yīng)用于澳洲堅(jiān)果誘變具有很大的優(yōu)勢(shì)：⁶⁰Co-γ射線是鈷原子核能級(jí)躍遷蛻變時(shí)釋放出的射線，具有很強(qiáng)的穿透力，它能穿透植物體內(nèi)部，并與植物細(xì)胞發(fā)生電離作用，電離產(chǎn)生的離子作用于細(xì)胞內(nèi)的核酸、蛋白質(zhì)、酶等生物大分子，使其遺傳性狀發(fā)生變化，從而形成一個(gè)遺傳意義上全新的物種。利用本發(fā)明可創(chuàng)制出大量具有明顯性狀變異的澳洲堅(jiān)果新種質(zhì)，創(chuàng)制出的新種質(zhì)可為澳洲堅(jiān)果本土品種選育奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，若部分具有較多優(yōu)異性狀的新種質(zhì)直接進(jìn)入選育種程序，可顯著縮短品種選育周期，可創(chuàng)造較大的經(jīng)濟(jì)收益。

與已有相關(guān)技術(shù)相比，本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)是：

①利用⁶⁰Co-γ射線輻照創(chuàng)制澳洲堅(jiān)果新種質(zhì)，技術(shù)成熟，安全可靠；