[發明專利]一種鑒別連翹衍生品的方法

有效

• 申請號: 201410044108.0
• 申請日: 2014-01-30
• 公開（公告）號: CN103808749A
• 公開（公告）日: 2014-05-21
• 發明（設計）人: 董建軍;張海艷;趙天增;郭唯;李曉;陳玲;范毅;常霞;王建軍;魏悅;李倩
• 申請（專利權）人: 河南省科高植物天然產物開發工程技術有限公司
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08;G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種鑒別連翹衍生品的方法，包括以下步驟：

1）取連翹衍生品直接作為含有活性成分組的連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物；

2）對所述連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物進行IGD核磁共振碳譜指紋圖譜檢測，根據指紋圖譜得到特征提取物中若干個活性成分特征峰峰強度；并用相同方式測定出所述各活性成分相應標準參照品的特征峰峰強度；

3）通過定量分析手段得到所述標準參照品的絕對含量；

4）利用各活性成分特征峰峰強度及相應標準參照品的特征峰峰強度的比值和所述標準參照品的絕對含量，計算出連翹衍生品中各活性成分的含量及活性成分組的含量。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，采用具有獲得清晰IGD核磁共振碳譜指紋圖譜的提取工藝作為所述連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物的提取方式。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2）中，對連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物進行IGD核磁共振碳譜指紋圖譜檢測，溶解連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物的溶劑為氘代二甲基亞砜或氘代甲醇。

4.根據權利要求1～3任意一項所述的方法，其特征在于，步驟2）中，連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物中，木脂素類活性成分的特征峰為C-7吸收峰，其化學位移為δ_C83.0～88.0；優選地，選擇C-7′作為特征峰進一步區別木脂素類活性成分中的連翹苷和表松脂素-4-β-D-葡萄糖苷，它們的化學位移為δ_C81.0～82.0；

連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物中，苯乙醇苷類活性成分的特征峰為C-9′吸收峰，其化學位移為δ_C165.0～170.0；優選地，選擇C-1或C-6作為特征峰進一步區別苯乙醇苷類活性成分中的連翹酯苷A和連翹酯苷H，它們的化學位移分別為δ_C119.0～120.0和δ_C129.0～130.0。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，步驟2）中，根據特征峰峰強度的大小和位置，對連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物中若干個活性成分進行排序。

6.根據權利要求1～5任意一項所述的方法，其特征在于，步驟3）中，所述定量分析手段為高效液相法。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，當鑒別連翹木脂素類活性成分時，所述高效液相法的條件包括流動相為乙腈：水=(20～30):(70～80)，優選25：75；檢測波長為277nm；

當鑒別苯乙醇苷類活性成分時，所述高效液相法的條件包括流動相為乙腈：冰醋酸溶液=(10～20):(80～90)，優選15：85；檢測波長為330nm。

8.根據權利要求1～7任意一項所述的方法，其特征在于，步驟3）中，所述標準參照品的絕對含量是指用定量分析手段測定的標準參照品的質量百分含量。

9.根據權利要求1～8任意一項所述的方法，其特征在于，連翹木脂素和苯乙醇苷特征提取物中的活性成分的標準參照品為連翹苷或連翹酯苷A。