[發明專利]一種腫瘤標記物及其在制備結直腸癌診斷試劑中的應用

有效

• 申請號: 201410043885.3
• 申請日: 2014-01-29
• 公開（公告）號: CN103740854A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 吳斌
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬第三醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C07K14/81;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京萬慧達知識產權代理有限公司 11111
• 代理人: 楊行宇;張金芝

技術領域

本發明屬于基因工程及腫瘤學領域，涉及一種與結直腸癌相關的血清/組織腫瘤標記物及其應用。

背景技術

結腸癌、直腸癌是常見的惡性腫瘤，進展期占大多數，其發病率已居惡性腫瘤的第4位。隨著經濟發展、生活方式、生活環境及膳食結構的改變，結直腸癌的發病率呈不斷上升趨勢。雖然結直腸癌的診斷水平有了提高，但早期結直腸癌的檢出率仍然較低而死亡率較高。據統計顯示，早期結腸癌根治后5年生存率約為80%，而進展期結腸癌術后5年生存率僅為50%。因此，早期診斷是提高結腸癌治愈率的關鍵因素，尋找敏感性、特異性高的腫瘤標志物成為臨床科學研究的重點目標。

血清腫瘤標志物是結腸癌診斷常用方法之一，CEA、CA19-9、CA242等。其中以CEA為主，有40%～70%結腸癌患者中CEA增高。但這些標記物單獨作為診斷胰腺癌的指標尚不精確，敏感性較低，并且在其他消化道腫瘤及良性疾病中也有升高，因此對結腸癌早期診斷的價值有限。另外，一些基因腫瘤標志物如p53,k-ras等也用于臨床結腸癌的早期診斷，但始終未能達到診斷的目的。因此，尋找敏感性高、特異性強、結果穩定的腫瘤標志物仍是結腸癌早期診斷中亟待解決的問題。

半胱氨酸蛋白酶抑制劑（Cystatins,CSTs）能抑制細胞內外的半胱氨酸蛋白酶，在腫瘤的生長、血管生成、浸潤和轉移起重要作用，可作為腫瘤診斷和預后估計的標志物。Cystatins最早是由Anastasi等采用親和層析的方法首次在雞蛋清中分離得到的對半胱氨酸蛋白酶有抑制作用的一種蛋白質，作為一個半胱氨酸蛋白酶抑制劑的超家族，依據其分子結構主要分成三大類：⑴胞內cystatin也稱stefis,包括A和B2個成員；⑵分泌型cystatins,包含有C、D、E/M、F、G、S、Sv和SA等成員；⑶血漿中的激肽原,包含低分子質量和高分子質量激肽原。目前這個家族中，研究較多，并且與惡性腫瘤關系較為明確的主要是CystatinA、B、C和M等。CST1、CST4、CST2均屬于Cystatin家族中的II型分泌蛋白，近年來有研究發現，Cyatatin?SN在胃癌組織中呈現高表達，并與胃癌細胞的侵襲轉移相關。又有研究結果表明，其在直腸癌細胞中和患者血液中有高表達。基于Cystatin家族的功能，將其作為臨床腫瘤標記物具有很大的臨床應用價值及前景。

發明內容

本發明的首要目的是針對上述技術問題，提出一種與結直腸癌相關的組織腫瘤標記物。

本發明的第二個目的是提供上述組織腫瘤標記物的mRNA引物及抗體。

本發明的第三個目的是提供上述組織腫瘤標記物的mRNA引物及抗體在制備結直腸癌診斷劑中的應用。

本發明的第四個目的在于提供一種檢測結直腸/直腸癌的試劑盒。

本發明的目的通過以下技術方案得以實施：

發明提供了一種與結直腸癌相關的組織基因標記物，該標記物為CystatinSN、CystatinS和CystatinSA中的一種或多種的組合。

優選地，所述的標記物為CystatinSN、CystatinS和CystatinSA的組合。

本發明同時提供了CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA在制備結直腸癌診斷試劑或結直腸癌診斷試劑盒中的應用。

更具體地說，本發明提供了CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA檢測試劑在制備結直腸癌診斷試劑或結直腸癌診斷試劑盒中的應用。

所述的檢測試劑包括檢測引物，序列如SEQ?ID?NO:1和/或SEQ?ID?NO:2。

或者，所述的檢測試劑包括CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白抗體。

所述的抗體可以通過商品化的途徑獲得。

發明同時提供給了一種用于診斷結直腸癌的試劑盒，含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA基因檢測試劑。

或者，用于診斷結直腸癌的試劑盒含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白檢測試劑。

或者，用于診斷結直腸癌的試劑盒含有基因檢測試劑和蛋白檢測試劑中的一種或多種。

更優選地，上述的診斷試劑或診斷試劑盒含有CystatinSN、CystatinS和CystatinSA基因的組合檢測試劑；或CystatinSN、CystatinS和CystatinSA蛋白的組合檢測試劑。