[發明專利]一種組織培養澳洲蘭豆的方法

無效

• 申請號: 201410024961.6
• 申請日: 2014-01-20
• 公開（公告）號: CN103749305A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權）人: 上海上房園藝有限公司;上海上房園林植物研究所有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術領域

本發明涉及一種植物組織培養方法，尤其是涉及一種組織培養澳洲蘭豆的方法。

背景技術

澳洲藍豆是豆科贗靛屬多年生宿根花卉植物。原產澳洲，常生于林緣。莖直立，高約50-100cm左右，成叢狀。羽狀復葉，互生、總狀花序生于莖頂，

花冠蝶形，藍色。花期4-5月。果實橢圓形或長圓形；種子棕黃色，腎形。可以露天宿根越冬。開春從基部萌發強壯新枝。喜冷涼，排水良好，通風，陽光充足的地方，忌悶熱潮濕環境。澳洲藍豆比較怕陰暗濕熱環境，栽培的環境一定要通風，向陽。可大面積片植做地被，也可叢植或配置于花境中，也是小庭院美化的優良材料。從國外引進的新品種，引種數量較少，其分株慢，市場需求量大，種苗供應受限制。因此需要開發組培技術以提高繁殖速度和苗木的整齊度，更好地保持原有的母本性狀，但是如何選擇組織培養基、組培的條件如何是需要亟待解決的問題。

發明內容

本發明的目的就是為了克服上述現有技術存在的缺陷而提供一種進行分步組織培養、提高成活率、保證母本性狀的組織培養澳洲蘭豆的方法。

本發明的目的可以通過以下技術方案來實現：

一種組織培養澳洲蘭豆的方法，采用以下步驟：

(1)無菌處理

摘取澳洲藍豆植株剛萌發的頂芽，用水沖洗2h，用75v/v％的乙醇浸泡30s，1v/v％0升汞浸泡15min，再用無菌水沖洗5-6次，無菌濾紙吸干表面水份，芽段切成1cm接種于芽誘導培養基上，控制培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，進行芽誘導培養；

(2)分化增殖

接種于芽誘導培養基上的芽段在培養4周后可見愈傷組織，再培養1個月后將帶芽愈傷組織接種于增殖培養基上，控制培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，進行分化增殖培養；

(3)不定芽壯苗

在增殖培養基上誘導出叢生的不定芽，將不定芽分成小叢或單芽置于壯苗培養基中，控制培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，進行壯苗培養，30天長到2-3cm；

(4)生根培養

將壯苗培養基中的不定芽轉接入生根培養基中誘導生根，控制培養溫度為24-26℃，光照為70-90μmol/ms，10天后幼苗基部分化出許多白色的根原基，30天后長至2-3em；

(5)煉苗移栽

生根培養40天根系長至1-2cm，選擇根系發達生長健壯的無菌苗在室內開瓶煉苗7天，取出后洗凈根部瓊脂，在溫室中馴化40天后即可移栽室外，給予肥水管理即可。

芽誘導培養基的營養成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L或MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L。

作為優選的實施方式，芽誘導培養基的營養成分為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L。

增殖培養基的營養成分為MS+6-BA1mg/L-+NAA0.1mg/L、MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L或MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L。

作為優選的實施方式，增殖培養基的營養成分為MS+6BA2mg/L+NAA0.2mg/L。

壯苗培養基的營養成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L。

作為優選的實施方式，壯苗培養基的營養成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。

生根培養基的營養成分為MS+NAA0.05mg/L、MS+NAA0.1mg/L或MS+NAA0.2mg/L。

作為優選的實施方式，生根培養基的營養成分為MS+NAA0.1mg/L。

所述的芽誘導培養基、增殖培養基、壯苗培養基、生根培養基還包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L組成的基本成分，上述培養基的pH值控制在5.8。

與現有技術相比，本發明通過選擇適合的培養基對澳洲蘭豆進行分步組織培養，從而提高繁殖速度和苗木的整齊度，更好地保持原有的母本性狀，另外移栽成活率可以達到85％。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細說明。

實施例1

一種組織培養澳洲蘭豆的方法，采用以下步驟：

(1)無菌處理