[發明專利]一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法

有效

• 申請號: 201410022568.3
• 申請日: 2014-01-17
• 公開（公告）號: CN103740797B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發明（設計）人: 劉冬;孫海燕;周麗珍;萬紅霞;李艷;唐旭蔚;從彥麗
• 申請（專利權）人: 深圳職業技術學院
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙)35200
• 代理人: 馬應森

1.一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于包括以下步驟：

1）將高溫花生粕粉碎，加入水，得花生粕粉料液，浸提后，料液離心，取上清液，靜置酸沉，再離心，收集沉淀，沉淀用水洗至中性，干燥后得花生蛋白粉；

2）將步驟1）得到的花生蛋白粉進行亞硫酸鈉前處理，得花生蛋白液；

3）在步驟2）得到的前處理后的花生蛋白液中，加入堿性蛋白酶，進行第一次酶解，再加入菠蘿蛋白酶，進行第二次酶解，料液升溫滅酶，停止酶解，得花生蛋白酶解液；

4）將步驟3）所得花生蛋白酶解液離心，收取上清液，超濾，收集超濾透過液，再納濾脫鹽處理，收集納濾截留液；

5）將納濾截留液進行冷凍干燥，即得高水解度功能性短肽。

2.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟1）中，所述高溫花生粕粉碎至80目，所述高溫花生粕與水的配比為1:8～12（m/v）；所述水可采用去離子水；所述花生粕粉料液最好調節pH為9.0～11.0，所述浸提的溫度可為40～60℃，浸提的時間可為2h。

3.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟1）中，所述料液離心的條件為3000rpm、15min；所述上清液最好調節pH值至4.5；所述靜置酸沉的時間可為30min；所述再離心的條件可為4000rpm、10min；所述干燥可采用冷凍干燥。

4.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟2）中，所述將步驟1）得到的花生蛋白粉進行亞硫酸鈉前處理為：將花生蛋白粉溶解在去離子水中配制成濃度為3%～5%（m/v）的花生蛋白液，加熱至50℃后，向花生蛋白液中加入Na₂SO₃至終濃度為0.04%～0.10%（m/v），并持續恒溫攪拌1h。

5.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟3）中，所述前處理后的花生蛋白液調節至pH8.0～8.5、溫度為50～55℃；所述加入堿性蛋白酶（Alcalase2.4，比活力138328U/g）的量可按每克花生蛋白加入5000～10000U/g酶；所述第一次酶解的時間可為180～240min。

6.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟3）中，所述加入菠蘿蛋白酶的溫度為40～45℃、pH6.0～7.0，加入菠蘿蛋白酶（比活力49395U/g的量按每克花生蛋白加入5000～10000U/g的酶，所述第二次酶解時間可為180～240min。

7.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟3）中，在各段酶解過程中溫度保持恒定，同時不斷攪拌溶液，并通過加入1mol/L的NaOH來維持pH恒定；所述升溫滅酶的條件可為在90℃下水浴滅酶20min。

8.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟4）中，所述離心的條件是在12000g條件下離心15min；所述超濾的條件為：采用截留分子量為1kDa的超濾膜，調節花生蛋白酶解液pH為6.8，在超濾壓力為0.086～0.193MPa、超濾溫度為25～45℃的條件下。

9.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟4）中，所述超濾采用恒體積超濾方式，所述恒體積超濾方式為：先在超濾設備料槽中加入超濾原液，然后利用一臺輔助泵在超濾過程中向料槽內不斷泵入去離子水，使水加入的流速與從超濾膜中透過的透過液流速相等，超濾過程中加入的去離子水總體積最好為料液初體積的2～6倍。

10.如權利要求1所述一種利用高溫花生粕制備高水解度功能性短肽的方法，其特征在于在步驟4)中，所述納濾的操作方法采用間歇式恒容積納濾，納濾的溫度為25℃，納濾的壓力為1.5MPa；所述間歇式恒容積納濾的具體操作方式可為：納濾原液體積為V₀，經納濾膜脫鹽、濃縮至Vr，Vr=1/3V₀，再加水稀釋至V₀，即每次透過液的體積與加水體積相同，隨著加水次數的增多，粗鹽脫除率逐漸增加，加水次數最好為10～20次。