[發明專利]用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201410020376.9
• 申請日: 2014-01-16
• 公開（公告）號: CN103789295A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 崔榮;劉伶俐;王虔祖;程輝;韓京龍
• 申請（專利權）人: 煙臺大學
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;G01N27/28
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立

1.一種用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取污水處理廠的活性污泥在培養基上接種，采用更代培養、連續曝氣的方式進行培養，得到菌液；

（2）將聚乙烯醇和海藻酸鈉加入到蒸餾水中，其中聚乙烯醇的質量濃度為8～15g/L，海藻酸鈉的質量濃度為2～4g/L，水浴加熱0.5h，在電動攪拌機的攪拌下，使其完全溶解，隨后冷卻至常溫，得到聚乙烯醇凝膠；

（3）將步驟（1）得到的菌液，經高速冷凍離心機在7000rpm/min下離心10min后,倒掉上清液，取得到的沉淀物與步驟（2）得到的聚乙烯醇凝膠以重量比1:4混合，再利用表面皿將混合物均勻涂成膜狀；

（4）在20～25℃條件下，將步驟（3）得到的膜狀混合物干燥0.5～2h，使其成膜后，將膜放入預先配制好的交聯固化溶液中，交聯固化1～2h，取出固化完成的膜，即得到用于毒性檢測生物傳感器的生物膜。

2.根據權利要求1所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中活性污泥的懸浮固體量為10248mg/L。

3.根據權利要求1所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）培養基的成分的組成為：葡萄糖：1000mg/L，NH₄CO₃：538.6mg/L，K₂HPO₄：17.86mg/L，MgCl₂·6H₂O：14.29mg/L，MnSO₄·4H₂O：2.143mg/L，CuSO₄·5H₂O：0.7143mg/L，CaCl₂·6H₂O：0.01786mg/L，FeSO₄·7H₂O：3.571mg/L。

4.根據權利要求1或3所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法，其特征在于，所述培養基氨氮濃度為95mgN/L。

5.根據權利要求1所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜的制備方法，其特征在于，所述步驟（4）中交聯固化溶液為H₃BO₃和CaCl₂的混合溶液，其中，H₃BO₃的質量濃度為4g/L，CaCl₂的質量濃度為1g/L。

6.一種如權利要求1至5任一項所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜在制作用于毒性檢測的生物傳感器上的應用。

7.一種采用如權利要求1至5任一項所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜制作出的用于毒性檢測的生物傳感器。

8.一種采用如權利要求7所述用于毒性檢測生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述制備方法的具體步驟為：將如權利要求1至5任一項所述用于毒性檢測生物傳感器的生物膜緊貼于溶解氧電極的聚四氟乙烯膜上，并用固定套固定，組裝成生物傳感器。