[發明專利]賽庚啶半抗原、抗原及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 201410018901.3 | 申請日: | 2014-01-16 |
| 公開(公告)號: | CN104792989A | 公開(公告)日: | 2015-07-22 |
| 發明(設計)人: | 溫凱;王照鵬;王戰輝;吳小平;賈良曦;秦譽;王進;蘇麗芳;覃丹鳳;曾江龍;殷緩緩;陳銀輝 | 申請(專利權)人: | 北京維德維康生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/531 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 100095 北京市海淀區北清路*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 賽庚啶 半抗原 抗原 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種賽庚啶半抗原,為式Ⅰ所示產物:
式Ⅰ。
2.式Ⅰ所示產物的制備方法,包括如下步驟:?
將3.3g賽庚啶,7.49g的氯碳酸乙酯和17mL甲苯中的混合物回流3.5小時;冷卻后,將反應混合物用鹽酸和水洗滌,然后干燥并濃縮;用正己烷處理,得到淺黃色結晶,重結晶,將殘余物固化從乙醇中,得到微黃色針狀結晶;產物加入50ml水,加入氫氧化鋰(一水)?8.36g,pH試紙檢測pH=10以上;室溫水解反應3h以上;用乙酸乙酯100ml萃取,萃取水解反應水相一到兩次,除去雜質,再用5mol/L的鹽酸調pH值到4左右,用乙酸乙酯萃取,旋干得到半抗原CHD-OCL。
3.一種賽庚啶抗原,是將式Ⅰ所示產物和載體蛋白偶聯得到的偶聯物。
4.權利要求3所述賽庚啶抗原的制備方法,包括如下步驟:
(1)取CHD-OCL?31.7mg溶于3mlDMF中;
(2)加入1ml0.01MPBS助溶,加入EDC?38mg,NHS?38mg,室溫活化2h;
(3)取載體蛋白100mg溶于10ml的0.1M碳酸氫鈉溶液中,將活化物在4℃冰水浴條件下,加入到蛋白中,4℃攪拌反應過夜;
(4)置1L0.01M?PBS中透析8次,得全抗原CHD-OCL-BSA;
(5)分裝,于-20℃保存備用。
5.權利要求3所述賽庚啶抗原在制備賽庚啶特異性抗體中的應用。
6.應用權利要求3所述賽庚啶抗原制備得到的特異性抗體。
7.權利要求1所述產物、權利要求3所述賽庚啶抗原、權利要求6所述抗體在檢測賽庚啶中的應用。
8.應用權利要求1所述產物、權利要求3所述賽庚啶抗原、權利要求6所述特異性抗體制備得到的酶聯免疫檢測試劑盒。
9.權利要求8所述酶聯免疫檢測試劑盒,其特征在于,它包括:包被有賽庚啶抗原的酶標板、酶標抗體工作液、賽庚啶系列標準品、底物顯色液、終止液、濃縮復溶液、濃縮洗滌液。
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