[發明專利]一種從脫脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法有效
| 申請號: | 201410015528.6 | 申請日: | 2014-01-14 |
| 公開(公告)號: | CN103740796A | 公開(公告)日: | 2014-04-23 |
| 發明(設計)人: | 趙金梁;趙發 | 申請(專利權)人: | 天津替代醫學科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P21/06 | 分類號: | C12P21/06 |
| 代理公司: | 天津才智專利商標代理有限公司 12108 | 代理人: | 王顕 |
| 地址: | 300130 天津市紅橋區*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 脫脂 蛋白 乳上清液中 提取 多肽 方法 | ||
技術領域
本發明涉及一種多肽的制備方法,特別涉及從含脂植物脫脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法。
背景技術
多肽是α-氨基酸以肽鏈連接在一起而形成的化合物,它也是蛋白質水解的中間產物。兩個氨基酸分子脫水縮合可形成二肽,多個氨基酸分子脫水縮合可形成三肽、四肽、五肽等。通常由10~100個氨基酸分子脫水縮合形成的化合物叫多肽,其分子量低于10,000道爾頓,能透過半透膜,不被三氯乙酸及硫酸銨所沉淀。
人體對蛋白質的吸收,主要是通過蛋白酶的作用將蛋白質降解成低肽的形式進行。實驗表明肽相較氨基酸能夠被小腸粘膜更易、更快速的吸收。經過酶水解后的蛋白質,會得到多肽的混合物,這些混合物在酸性條件下的溶解性大大提高,并且具有濃度高粘度低的優良特性。雖然國內外對植物蛋白活性肽的研究已經達到一定水平,且相關產品已應用于醫療保健,但主要為大豆活性肽產品,對于其他植物的活性肽研究才剛剛起步,相關產品甚少,無法滿足食品工業需求。
國內多肽的提取主要是從飼料餅粕中分離出蛋白質,然后經過酶解來提取多肽,不論是傳統的壓榨法還是浸出法,制得的粕中蛋白質都會發生一定程度的變性,這給蛋白質的深加工帶來了很大的難題,導致多肽的提取率低,蛋白質利用率不高。傳統工藝方法制得的粕存在很多缺陷,如壓榨法中,粕中的殘油率高,給蛋白質的分離純化造成了很大的困難,且壓榨法制得粕經過高溫,蛋白質變性嚴重,更加不利于蛋白質的提??;浸出法制得的粕殘留有機溶劑,直接影響蛋白質分離純化的品質,粕經過蛋白質提取后變成了廢液,無法再進行加工利用,導致原料利用不充分,浪費資源。
李雄輝,過新勝等在1999年09期《食品科學》中發表的《大豆多肽提取工藝的研究》一文中將大豆先進行低溫脫溶得到豆粕,再經過水提取過程初步得到蛋白質,之后使用酸沉的辦法進行蛋白質純化,最后使用雙酶對蛋白質進行水解得到多肽。這種方法原料單一,從大豆中提取蛋白質過程復雜、成本過高。徐懷德,陳金海等在200710017281.1中公開了一種核桃多肽粉的制作方法,該方法不僅保留了核桃的多種營養成分,并且核桃多肽粉多肽的含量達到了60-80%,這一發明過程首先是將核桃粕進行粉碎,然后采用超聲波法浸提蛋白質。對真空干燥后的蛋白質使用木瓜蛋白酶進行酶解,經滅酶、離心、取上清液透析,經濃縮,真空干燥后即可得到多肽。這種方法從粕中提取蛋白質難度大,并且需要進一步的提純,能源消耗大。
國內酶法多肽成熟工藝所使用的原料是蛋白含量為90%的大豆分離蛋白。大豆分離蛋白在生產過程中會產生嚴重的環境污染等問題,不符合我國可持續發展戰略,將逐步被淘汰。其余酶解多肽大多利用飼料蛋白作為原料,通過堿溶酸沉提取蛋白質后,再利用蛋白酶來酶解制成多肽粉。這種方法有提取過程復雜,廢棄物太多,蛋白提取困難等諸多問題。
發明內容
為了解決上述技術問題,本發明提供了一種從脫脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法,該方法減少了蛋白質的提取步驟,工藝流程短、操作簡單,適于工業化生產。
為此,本發明的技術方案如下:
一種從脫脂蛋白乳上清液中提取多肽的方法,包括如下步驟:
1)將含脂植物熱磨制漿,經離心機處理,得到輕相液為植物油脂,重相液為脫脂蛋白乳;
2)調節所述脫脂蛋白乳pH=4.0~5.0,再在所述脫脂蛋白乳的等電點下進行沉淀,得到脫脂乳上清液和蛋白濃漿;
3)收集所述脫脂乳上清液,并調節其pH=8.2~8.9,再向其中加入所述脫脂乳上清液質量2~4%的胰蛋白酶,在40℃、攪拌條件下酶解3.5~6h,得到酶解液;
4)將所述酶解液在85~95℃條件下加熱4~8min,滅酶得到無酶液;
5)向所述無酶液中加入占其質量4~6%的活性炭,攪拌15~40min脫苦脫色;然后除去其中的活性炭,得到上清液;
6)將所述上清液濃縮至固體含量為30~40wt%后進行噴霧干燥,得到多肽粉。
所述含脂植物為核桃仁、花生仁、玉米、大豆、葵花籽、亞麻籽、菜籽、芝麻或杏仁。
步驟1)中所述脫脂蛋白乳中蛋白質含量為21~46wt%。
步驟2)中得到脫脂乳上清液和蛋白濃漿時的沉淀率為73~88%。
在步驟2)中通過HCl調節pH值。
在步驟3)中通過NaOH調節pH值。
步驟5)除去活性炭使用的是振動卸料離心機、螺旋卸料離心機。
步驟6)中上清液的濃縮方法為將所述上清液利用降膜蒸發器,在真空度850~890mbar,溫度48~52℃下進行真空濃縮。
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