[發明專利]一種陽離子聚氨基酸基因載體材料及其制備方法

有效

• 申請號: 201410013791.1
• 申請日: 2014-01-13
• 公開（公告）號: CN103755955A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 劉杰;蔣慶;高迪;陳可欣;余柏青
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C08G69/48
• 分類號: C08G69/48;C08G69/14;C08G69/16;C12N15/87
• 代理公司: 廣州市深研專利事務所 44229
• 代理人: 姜若天

1.一種陽離子聚氨基酸基因載體材料，其結構式如式（Ⅰ）所述：

（Ⅰ）

式（Ⅰ）中，x、y及n的范圍如下：11<x<480，1<y<295，1<n<423，x、y及n均為整數。

2.權利要求1所述陽離子聚氨基酸基因載體材料的制備方法，其特征在于包括如下步驟：首先，分別制備天冬氨酸芐酯及組氨酸單體的N-羧基-α-氨基酸酐NCA，并以含有伯胺的物質作為引發劑引發兩種氨基酸NCA進行開環聚合；再利用脫保護試劑脫去組氨酸上的保護基團；最后，利用胺解試劑二乙烯三胺進行天冬氨酸側鏈的胺解修飾，從而得到二乙烯三胺修飾的氨基酸類陽離子共聚物。

3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）組氨酸?NCA的合成：以四氫呋喃為溶劑，在氮氣保護及室溫條件下，組氨酸單體與亞硫酰氯反應得到黃色透明溶液后，迅速沉淀于倍8-20倍體積的無水乙醚中，得到淡黃色固體沉淀物，過濾后抽真空干燥，得到初級產物；將初級組氨酸?NCA溶于硝基甲烷中，過濾取濾液沉淀于無水乙醚中，抽真空干燥，重復此提純步驟3-5遍，得到純凈組氨酸NCA；

（2）天冬氨酸?NCA的合成：以四氫呋喃為溶劑，在氮氣保護及40-70℃條件下，天冬氨酸單體與三光氣反應得到無色透明溶液后，迅速沉淀于8-20倍體積正己烷中，得到白色固體沉淀，過濾后抽真空干燥，得到天冬氨酸?NCA初級產物；將初級天冬氨酸NCA溶于乙酸乙酯中，過濾取濾液冷卻重結晶，重復此提純步驟3-5遍，得到純凈天冬氨酸芐酯NCA；?

（3）氨基酸NCA開環聚合：以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑，氨基酸NCA在含有伯胺官能團的物質進行引發，在25-60℃、氮氣保護條件下，至少反應72小時，產物于N,N-二甲基甲酰胺中透析后再于蒸餾水中透析并凍干，得到聚組氨酸-天冬氨酸共聚物?P(HIS(DNP)-co-BLA)；

（4）聚合物中組氨酸單體咪唑基團脫保護：分別將聚合物P(HIS(DNP)-co-BLA)及脫保護試劑2-巰基乙醇溶于二甲基亞砜中，室溫下，將巰基乙醇溶液緩慢加入聚合物溶液，反應1-3天，反應產物于二甲基亞砜中透析后再于水中透析并凍干，得到產物P(HIS-co-BLA)；

（5）聚合物天冬氨酸芐酯胺解反應：取P(HIS-co-BLA)溶解于N-甲基吡咯烷酮中并加入二乙烯三胺,?室溫下反應1-24小時，產物于蒸餾水中透析并凍干，得到最終產物P(HIS-co-ASP(DET))。