[發(fā)明專利]一種甘藍(lán)小孢子單倍體植株加倍的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410011524.0 | 申請日： | 2014-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN103749300A | 公開（公告）日： | 2014-04-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張恩慧;楊安平;程永安;許忠民;程芳芳;董韓;唐桃霞 | 申請（專利權(quán)）人： | 西北農(nóng)林科技大學(xué) |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 712100 陜*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 甘藍(lán) 孢子 單倍體 植株 加倍 方法 | ||
1.一種甘藍(lán)小孢子單倍體植株加倍的方法，其特征在于，包括下列步驟：
1）選擇小孢子單倍體植株花薹莖生幼嫩葉片，切成1cm2左右的小片作為離體培養(yǎng)的外植體；
2）將無菌外植體放入外植體浸泡溶液中浸泡24h～48h；
3）把浸泡后的外植體接種到培養(yǎng)瓶內(nèi)的外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在溫度25℃下，暗培養(yǎng)25d，隨后轉(zhuǎn)入光培養(yǎng)，12h～14h/d光照，光照強(qiáng)度?2000～2500Lx，經(jīng)20～25天誘導(dǎo)出不定芽；
4）待不定芽生長至3.0～3.5?cm高，自不定芽基部切下將其轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶內(nèi)的生根培養(yǎng)基上，在溫度?25℃，12h～14h/d光照，光照強(qiáng)度?2500～3000Lx的條件下培養(yǎng)，經(jīng)20～25d誘導(dǎo)生根，獲得再生苗；
5）將有再生苗的培養(yǎng)瓶口打開，室內(nèi)鍛煉3～5天，再移田間遮陽網(wǎng)棚鍛煉2～3天，隨后從培養(yǎng)瓶中取出再生苗，洗去根部的培養(yǎng)基浸蘸殺菌藥劑，直接移栽到紗網(wǎng)棚內(nèi)，栽培促其生長，翌年再生植株抽薹開花，采用再生植株形態(tài)學(xué)觀察與氣孔保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)法結(jié)合的方法鑒定倍性，獲得加倍的雙單倍體植株；
所述的外植體浸泡溶液是含有濃度為0.2～10?mg/L秋水仙素和濃度為1.0～5.0?mg/L?6-芐氨基腺嘌呤的蒸餾水溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘藍(lán)小孢子單倍體植株加倍的方法，其特征在于，所述的外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖、8g/L瓊脂、2.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤及0.1mg/L的α-萘乙酸，pH值為5.8～6.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的甘藍(lán)小孢子單倍體植株加倍的方法，其特征在于，所述的生根培養(yǎng)基為：?MS培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖、8g/L瓊脂和0.1～1.0mg/L的α-萘乙酸、0.01mg/L稀效唑，pH值為5.8～6.0。
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