[發明專利]一種雙三氟蟲脲殘留量的測定方法

有效

• 申請號: 201410007694.1
• 申請日: 2014-01-07
• 公開（公告）號: CN103728401A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 崔淑華;趙晗;衣維賢;于曉云;王靜;王興華
• 申請（專利權）人: 崔淑華
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種雙三氟蟲脲殘留量的測定方法，更具體地說是采用高效液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）定性定量測定蔬菜、水果和茶葉中殘留的雙三氟蟲脲含量的方法，屬于農藥殘留量的測定技術領域。

背景技術

鱗翅目害蟲是我國大部分地區蔬菜和水果生產中的重要害蟲，危害嚴重的害蟲有小菜蛾、菜青蟲、甜菜夜蛾，斜紋夜蛾、蘋果蠹蛾和潛葉蛾等。近年來，鱗翅目害蟲發生頻率不斷增長，危害程度不斷加重，時常有爆發成災的報道。而農藥的大量不合理使用使害蟲對多種常規農藥產生了高水平的抗藥性，為控制害蟲爆發危害，國內外研究者開發了一些高效、超高效、低毒新型農藥品種來防治鱗翅目害蟲的危害。

雙三氟蟲脲(Bistrifluron)是韓國東寶化學公司從2000多個苯甲酰脲衍生物中篩選出的高活性昆蟲生長調節劑，屬于新型2-氯-3，5-雙(三氟甲基)苯基苯甲酰基脲衍生物，結構新穎，作用機制獨特且生物活性高。雙三氟蟲脲對昆蟲具有顯著的生長發育抑制作用，該化合物抑制昆蟲幾丁質形成，影響內表皮生成，使昆蟲不能順利蛻皮而死亡，能有效防治蔬菜、茶葉、棉花等多種植物的大多數鱗翅目害蟲，對白粉虱有特效，對抗性害蟲普遍有效，且對作物、天敵、人畜和環境高度安全，其制劑10%SC、10%EC正在韓國使用，主要用于蔬菜、果樹防治鱗翅目害蟲。雙三氟蟲脲是應用前景很好的防治鱗翅目害蟲的殺蟲劑。

隨著雙三氟蟲脲的登記、推廣和使用，作為我國蔬菜和水果主要出口市場的韓國和日本對其制定了殘留限量標準。韓國規定雙三氟蟲脲在黃瓜、大蔥、白菜、辣椒、甜椒等蔬菜中的最大允許殘留量為0.2～2.0mg/kg、在西瓜、蘋果、桃子、梨等水果中的最大允許殘留量為0.2～1.0mg/kg；日本規定雙三氟蟲脲在蔬菜、水果和茶葉等食品中實行0.01mg/L的“一律標準”。

國外有三篇關于果蔬中雙三氟蟲脲殘留量檢測方法的報道，其中有兩種方法采用液相色譜-紫外檢測器進行分析，另一種方法采用ELISA方法進行檢測。這三種檢測方法均存在前處理操作步驟繁瑣，不能對其進行準確定性的缺點。因此，建立簡便、快速、能準確定性和定量分析蔬菜、水果和茶葉中雙三氟蟲脲殘留量檢測方法具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種蔬菜、水果和茶葉中雙三氟蟲脲殘留量的測定方法。

為實現以上目的，本發明所采用的技術方案是：一種雙三氟蟲脲殘留量的測定方法，包括如下步驟：

（1）提取

稱取樣品于具塞離心管中，加入乙腈或1%乙酸乙腈均質提取1min，加入無水硫酸鎂、氯化鈉或乙酸鈉離心。

（2）凈化

移取樣品提取液上清液于離心管中，加入基質分散固相萃取劑，渦旋振蕩，離心，吸取上清液過0.22μm有機相濾膜。

（3）標準工作溶液的配制

將空白樣品按上述步驟（1）、（2）處理，用該空白樣品基質溶液在0.5～200μg/L范圍內，配制至少5個濃度的雙三氟蟲脲系列濃度標準工作液。

（4）液相色譜-串聯質譜法（LC-MS/MS）測定

將步驟（3）中的各濃度梯度的標準工作液進行LC-MS/MS測定，以標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準工作曲線；在相同條件下將步驟（2）中凈化后的樣品液注入LC-MS/MS進行測定，測得樣品液中雙三氟蟲脲的色譜峰面積，代入標準曲線，得到樣品液中雙三氟蟲脲含量，然后根據樣品液所代表試樣的質量計算得到樣品中雙三氟蟲脲殘留量。若上機溶液中雙三氟蟲脲殘留量超過線性范圍上限，需用提取溶劑將上機溶液濃度稀釋至線性范圍之內。

步驟（1）中樣品若為脫水果蔬或茶葉，需降低稱樣量，并加適量水充分浸潤。

步驟（1）中采用乙腈提取時加入氯化鈉鹽析，采用1%乙酸乙腈提取時加入乙酸鈉鹽析；含水量較少的樣品鹽析時需加入一定量的水。

步驟（2）中基質分散固相萃取劑由無水硫酸鎂、C₁₈和PSA組成，每體積提取液中無水硫酸鎂、C₁₈和PSA加入量分別為150mg、50mg和25mg。

步驟（4）中液相色譜的流動相為A：含5mmol/L乙酸銨的水溶液，流動相B：乙腈，流速0.2-0.4mL/min，進樣量5μL。

步驟（4）中液相色譜使用梯度洗脫的方法，梯度洗脫程序為：