[發(fā)明專利]一種親和性觸角狀酶固定化載體

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410001850.3
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103710332A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉曉寧;楊長青;魏榮卿
• 申請（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種親和性觸角狀酶固定化載體，其特征在于該載體按以下步驟制備：由氯乙酰化聚苯乙烯微球，通過原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法或ATRP法進(jìn)行單體如甲基丙烯酸縮水甘油酯即GMA或和丙烯酰胺即AM共聚或和丙烯酸酯即MA共聚接枝，合成得到一觸角狀的環(huán)氧載體，而后再通過酸或和堿分別對其進(jìn)行部分開環(huán)或先全開環(huán)再部分閉環(huán)，得到不同環(huán)氧基分布的、親和性觸角狀酶固定化載體，該載體可用于脂肪酶或蛋白酶的柔性固定化。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種親和性觸角狀酶固定化載體，其特征在于所述的親和性觸角狀酶固定化載體的觸角狀的不同鏈長可通過氯乙酰化聚苯乙烯微球功能基-CH₂Cl與單體的摩爾比的不同而獲得，其中氯乙酰化聚苯乙烯微球功能基-CH₂Cl與丙烯酰胺或丙烯酸酯和甲基丙烯酸縮水甘油酯的摩爾比的范圍為1∶5∶15至1∶40∶120。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種親和性觸角狀酶固定化載體，其特征在于所述的親和性觸角狀酶固定化載體可由不同鏈長的觸角狀的環(huán)氧載體經(jīng)部分開環(huán)得到表面含有部分極性羥基基團(tuán)的、相同或相近環(huán)氧基擔(dān)載量的、不同鏈長的觸角狀酶固定化載體，由其固定化酶。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種親和性觸角狀酶固定化載體，其特征在于所述的親和性觸角狀酶固定化載體可由不同鏈長的觸角狀的環(huán)氧載體經(jīng)先全開環(huán)再部分閉環(huán)得到不同或相同或相近環(huán)氧基擔(dān)載量的、不同鏈長的觸角狀酶固定化載體，由其固定化酶。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述的一種親和性觸角狀酶固定化載體，將其用于脂肪酶或蛋白酶的柔性固定化，其特征在于所述的不同環(huán)氧基分布的、親和性觸角狀酶固定化載體固定化酶按以下步驟制備：首先將酶溶解于緩沖液中，再加入親和性觸角狀酶固定化載體，在20～45℃振蕩反應(yīng)20～50h，反應(yīng)結(jié)束后用相同的緩沖液清洗所制備的固定化酶數(shù)次后獲得柔性固定化酶。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的一種親和性觸角狀酶固定化載體，其特征在于所述的親和性觸角狀酶固定化載體由于部分開環(huán)，在鏈末端會產(chǎn)生一些親水性的極性基團(tuán)，這些極性基團(tuán)的親水性可起到與酶分子相容性改善的作用，進(jìn)而在維持蛋白分子正常構(gòu)象的環(huán)境下固定化酶，使得酶活提高。