[發明專利]從外周血中產生腫瘤反應性T細胞富集群的方法

有效

• 申請號: 201380075806.0
• 申請日: 2013-04-30
• 公開（公告）號: CN105163745B
• 公開（公告）日: 2020-06-12
• 發明（設計）人: 阿萊娜·格羅斯;史蒂文·A·羅森伯格
• 申請（專利權）人: 美國衛生和人力服務部
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;C12N5/0783;G01N33/50;G01N33/569
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的方法，所述方法包括：

(a)從外周血樣本中獲得外周血單個核細胞(PBMCs)的混合群；

(b)從混合群中特異地選擇還表達PD-1和/或TIM-3的CD8⁺ T細胞；和

(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群。

2.獲得包含富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的藥物組合物的方法，所述方法包括：

(a)從外周血樣本中獲得外周血單個核細胞(PBMCs)的混合群；

(b)從混合群中特異地選擇還表達PD-1和/或TIM-3的CD8⁺ T細胞；

(c)將(b)中選擇的細胞與未被選擇的細胞分離，以獲得富集腫瘤反應性T細胞的細胞群；和

(d)將富集腫瘤反應性T細胞的細胞群與藥學上可接受的載體組合，以獲得包含富集腫瘤反應性T細胞的細胞群的藥物組合物。

3.如權利要求1或2中任一項所述的方法，其中(b)包括從所述混合群中特異地選擇表達TIM-3的CD8⁺ T細胞。

4.如權利要求1或2所述的方法，其中(b)包括從所述混合群中特異地選擇表達PD-1的CD8⁺ T細胞。

5.如權利要求1或2所述的方法，其中(b)包括從所述混合群中特異地選擇為(i)TIM-3⁺/PD-1⁺、(ii)TIM-3^-/PD-1⁺或(iii)TIM-3⁺/PD-1^-的CD8⁺ T細胞。

6.如權利要求1或2所述的方法，其中獲得所述富集腫瘤反應性T細胞的細胞群而沒有進行自體腫瘤識別的篩選。

7.如權利要求1或2所述的方法，其中在(b)之前，未對所述T細胞混合群進行非特異性刺激。

8.如權利要求1或2所述的方法，其還包括將(c)中獲得的富集細胞群中的T細胞的數量進行擴增。

9.如權利要求1或2所述的方法，其還包括在存在TWS119、白介素-21(IL-21)、IL-12、IL-15、IL-7、轉化生長因子(TGF)β以及AKT抑制劑(AKTi)中的任何一種或多種的情況下，培養(c)中獲得的富集細胞群。

10.如權利要求1或2所述的方法，其還包括用腫瘤抗原和/或用自體腫瘤T細胞刺激(c)中獲得的富集細胞群。

11.如權利要求1或2所述的方法，其還包括用核苷酸序列轉導或轉染(c)中獲得的富集群中的細胞，所述核苷酸序列編碼IL-12、IL-7、IL-15、IL-2、IL-21、mir155以及抗PD-1siRNA中的任何一種或多種。