[發明專利]基因表達的調控

有效

• 申請號: 201380067675.1
• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN104884622B
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 威廉·阿利斯特·萊恩;羅格·保羅·海倫斯;理查德·科林·麥克奈特;肖恩·邁克爾·溫斯利·布利
• 申請（專利權）人: 新西蘭植物和食品研究院有限公司
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N15/82;C12N5/10;A01H5/00;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 11112
• 代理人: 丁業平;高釗

1.一種多核苷酸，所述多核苷酸具有選自SEQ ID NO:41、44、46至48、57、61、64、66至68、73至75、77以及129至131的序列，其中所述多核苷酸包括修飾，所述修飾減少、干擾或阻止uORF多肽的翻譯，所述uORF多肽具有選自SEQ ID NO:1、4、6至8、13至15、17、21、24、26至28、33至35、37以及132至137的序列且調控GDP-L-半乳糖磷酸化酶GGP翻譯。

2.權利要求1所述的多核苷酸，其中所述修飾為在選自SEQ ID NO:41、44、46至48、57、61、64、66至68、73至75、77以及129至131的序列中至少一個核苷酸的缺失、添加或置換的至少一者。

3.權利要求1所述的多核苷酸，其中所述修飾減少、干擾或破壞uORF多肽的活性，所述uORF多肽具有SEQ ID NO:1和21、以及132至137中的任一者的序列。

4.前述權利要求中任一項所述的多核苷酸，其可操作地連接至目標核酸序列。

5.權利要求4所述的多核苷酸，其中所述目標核酸序列編碼目標蛋白。

6.一種構建體，包含權利要求1至3中任一項所述的多核苷酸。

7.權利要求6所述的構建體，其中所述多核苷酸可操作地連接至目標核酸序列。

8.權利要求7所述的構建體，其中所述多核苷酸和核酸序列在自然界中通常不相連。

9.權利要求6至8中任一項所述的構建體，其中所述多核苷酸能夠受到抗壞血酸的調控。

10.權利要求9所述的構建體，其中可操作地連接至多核苷酸的任意核酸序列的表達受到所述抗壞血酸的調控。

11.權利要求10所述的構建體，其中可操作地連接的核酸的表達是由所述抗壞血酸與所述uORF肽之間的相互作用調控的，所述uORF肽由所述多核苷酸表達。

12.一種在細胞、植物細胞或植物中調節或控制至少一種核酸序列表達的方法，包括用權利要求1至5中任一項所述的多核苷酸或權利要求6至11中任一項所述的構建體轉化所述的細胞、植物細胞或植物。

13.一種制備具有改變的基因表達的細胞、植物細胞或植物的方法，該方法包括用權利要求1至5中任一項所述的多核苷酸或權利要求6至11中任一項所述的構建體轉化細胞、植物細胞或植物。

14.權利要求12或13所述的方法，其中所述的細胞、植物細胞或植物產生了通過引入的多核苷酸、或通過由引入的多核苷酸編碼的uORF肽調節或改變表達的抗壞血酸。

15.一種制備具有以下至少一者的植物細胞或植物的方法：

a)增多的GGP翻譯，

b)增多的GGP產生，

c)增強的GGP活性，以及

d)增多的抗壞血酸產生，

所述方法包括在所述植物細胞或植物中修飾GGP基因的5’-UTR，

其中所述5’-UTR具有以下至少一者：

i)SEQ ID NO:41、44、46至48、53至55、57、61、64、66至68、73至75、77、81、84、86至88、93至95、97以及126至131中的任一者的序列，和

ii)編碼多肽的序列，所述多肽具有SEQ ID NO:1、4、6至8、13至15、17、21、24、26至28、33至35、37以及132至137中的任一者的序列，以及

其中所述修飾干擾所述5’-UTR編碼的uORF的功能。