[發明專利]生成及使用經遺傳修飾的非人動物的方法

在審

• 申請號: 201380056429.6
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN104918483A
• 公開（公告）日: 2015-09-16
• 發明（設計）人: R·弗拉維爾;T·施特羅維希;M·G·曼茨;C·博爾索蒂;M·多達普卡;A·J·墨菲;S·史蒂文斯;G·D·雅克波羅斯
• 申請（專利權）人: 再生元制藥公司;耶魯大學;生物醫學研究院
• 主分類號: C07K14/54
• 分類號: C07K14/54
• 代理公司: 北京龍雙利達知識產權代理有限公司 11329
• 代理人: 肖鸝;王君

1.一種生成經遺傳修飾的非人動物的方法，其包括生成包含下述各項的非人動物：

在非人動物IL-6基因座處與IL-6啟動子可操作連接的編碼人IL-6的核酸，和

至少一種選自下組的別的核酸：

i)與SIRPa啟動子可操作連接的編碼人SIRPa的核酸；

ii)與M-CSF啟動子可操作連接的編碼人M-CSF的核酸；

iii)與IL-3啟動子可操作連接的編碼人IL-3的核酸；

iv)與GM-CSF啟動子可操作連接的編碼人GM-CSF的核酸；和

v)與TPO啟動子可操作連接的編碼人TPO的核酸。

2.權利要求1的方法，其中所述IL-6啟動子是非人動物IL-6啟動子，且所述編碼人IL-6的核酸在非人動物IL-6基因座處與非人動物IL-6啟動子可操作連接。

3.權利要求1的方法，其中所述編碼人M-CSF的核酸在非人動物M-CSF基因座處，所述編碼人IL-3的核酸在非人動物IL-3基因座處，所述編碼人GM-CSF的核酸在非人動物GM-CSF基因座處，且所述編碼人TPO的核酸在非人動物TPO基因座處。

4.權利要求1的方法，其中所述非人動物是免疫缺陷的。

5.權利要求4的方法，其中所述非人動物不表達重組活化基因。

6.權利要求4的方法，其中所述非人動物不表達IL2受體γ鏈。

7.權利要求4的方法，其中所述非人動物不表達RAG2且不表達IL2rg。

8.權利要求1的方法，其進一步包含人造血細胞的移入。

9.權利要求8的方法，其中所述人造血細胞是CD34+細胞。

10.權利要求8的方法，其中所述人造血細胞是多發性骨髓瘤細胞。

11.權利要求1的方法，其中所述非人動物是小鼠。

12.一種生成模擬人B細胞形成和功能的動物模型的方法，該方法包括：將人造血細胞群體移植入經遺傳修飾的非人動物中，該經遺傳修飾的非人動物是免疫缺陷的且包含在非人動物IL-6基因座處與IL-6啟動子可操作連接的編碼人IL-6的核酸，其中該動物表達人IL-6且不表達非人動物IL-6。

13.權利要求12的方法，其中所述IL-6啟動子是非人動物IL-6啟動子，且所述編碼人IL-6的核酸在非人動物IL-6基因座處與非人動物IL-6啟動子可操作連接。

14.權利要求12的方法，其中移植的造血細胞群體包含CD34+細胞。

15.權利要求12的方法，其中移植的造血細胞群體包含多發性骨髓瘤細胞。

16.權利要求12的方法，其中所述非人動物進一步包含與SIRPa啟動子可操作連接的編碼人SIRPa的核酸，其中該核酸是隨機整合入非人動物的基因組中的。

17.權利要求16的方法，其中所述經遺傳修飾的非人動物表達至少一種選自下組的別的人核酸：

i)與M-CSF啟動子可操作連接的編碼人M-CSF的核酸；

ii)與IL-3啟動子可操作連接的編碼人IL-3的核酸；

iii)與GM-CSF啟動子可操作連接的編碼人GM-CSF的核酸；和

iv)與TPO啟動子可操作連接的編碼人TPO的核酸。

18.權利要求12-17中任一項的方法，其中所述非人動物是小鼠。