[發(fā)明專利]用于在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中生產(chǎn)人類(lèi)抗體的復(fù)雜的染色體工程

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380041315.4
• 申請(qǐng)日: 2013-08-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104755493B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: Y·黑巖;H·松下;A·佐野
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: SAB有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/00
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/00;C12N15/85;C12N15/87;C12N15/90;A01K67/027
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33239
• 代理人: 鄭洪成

1.一種包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的基因編碼：

(a) 一條或多條人類(lèi)抗體重鏈，其中編碼抗體重鏈的各基因與類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件可操作地連接；

(b) 一條或多條人類(lèi)抗體輕鏈；以及

(c) 編碼嵌合IgM重鏈恒定區(qū)的基因，其中所述編碼嵌合IgM重鏈恒定區(qū)的基因是編碼被牛IgM重鏈恒定區(qū)基因的DNA替換的人類(lèi)IgM重鏈恒定區(qū)基因；

其中所述編碼嵌合IgM重鏈恒定區(qū)的基因編碼恒定區(qū)CH結(jié)構(gòu)域CH1、CH2、CH3和CH4，以及跨膜結(jié)構(gòu)域TM1和TM2；和

(i) 編碼所述人類(lèi)IgM重鏈恒定區(qū)基因中CH1結(jié)構(gòu)域、CH2結(jié)構(gòu)域、CH3結(jié)構(gòu)域、CH4結(jié)構(gòu)域、TM1結(jié)構(gòu)域和TM2結(jié)構(gòu)域的DNA分別被編碼所述牛IgM重鏈恒定區(qū)基因中CH1結(jié)構(gòu)域、CH2結(jié)構(gòu)域、CH3結(jié)構(gòu)域、CH4結(jié)構(gòu)域、TM1結(jié)構(gòu)域和TM2結(jié)構(gòu)域的DNA所替換；或

(ii) 編碼所述人類(lèi)IgM重鏈恒定區(qū)基因中CH2結(jié)構(gòu)域、CH3結(jié)構(gòu)域、CH4結(jié)構(gòu)域、TM1結(jié)構(gòu)域和TM2結(jié)構(gòu)域的DNA分別被編碼所述牛IgM重鏈恒定區(qū)基因中CH2結(jié)構(gòu)域、CH3結(jié)構(gòu)域、CH4結(jié)構(gòu)域、TM1結(jié)構(gòu)域和TM2結(jié)構(gòu)域的DNA所替換；

其中編碼所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈的基因的至少一個(gè)類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件被牛衍生的類(lèi)別調(diào)節(jié)元件所替換，其中所述的牛衍生的類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件是Iγ-Sγ類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件，并且所述的Iγ-Sγ類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件是Iγ₁-Sγ₁。

2.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈包含人類(lèi)IgG抗體重鏈。

3.權(quán)利要求2所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的人類(lèi)IgG抗體重鏈包含IgG1抗體重鏈。

4.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈包含人類(lèi)IgA抗體重鏈。

5.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈包含人類(lèi)IgM抗體重鏈。

6.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈包含IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgE和IgD人類(lèi)抗體重鏈。

7.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈包含人類(lèi)IgG抗體重鏈，其中所述的人類(lèi)IgG抗體重鏈恒定區(qū)的跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域被牛衍生的IgG抗體重鏈恒定區(qū)的跨膜結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域所替換。

8.權(quán)利要求7所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的人類(lèi)IgG抗體重鏈包含人類(lèi)IgG1抗體重鏈。

9.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中編碼所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈的基因的各類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件被牛衍生的類(lèi)別轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)元件所替換。

10.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的人類(lèi)人工染色體的載體包含編碼人類(lèi)抗體替代輕鏈的一條或多條基因，其中所述的人類(lèi)抗體替代輕鏈選自VpreB1、VpreB3和λ5人類(lèi)抗體替代輕鏈。

11.權(quán)利要求1所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其進(jìn)一步包含牛衍生的增強(qiáng)子，該增強(qiáng)子與編碼所述的一條或多條人類(lèi)抗體重鏈的一條或多條基因可操作地連接。

12.權(quán)利要求11所述的包含基因的人類(lèi)人工染色體的載體，其中所述的增強(qiáng)子包含3’Eα增強(qiáng)子。