[發明專利]高轉導效率的rAAV載體、組合物及其使用方法

有效

• 申請號: 201380034940.6
• 申請日: 2013-05-15
• 公開（公告）號: CN104470945B
• 公開（公告）日: 2021-08-13
• 發明（設計）人: 阿倫·斯里瓦斯塔瓦;喬治·弗拉基米羅維奇·阿斯拉尼迪;基姆·M·萬弗利特;馬維斯·阿格班杰-麥克納
• 申請（專利權）人: 佛羅里達大學研究基金會有限公司
• 主分類號: C07K14/05
• 分類號: C07K14/05;C12N15/35;C12N15/864;A61K38/16;A61K48/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;顧晉偉

1.一種經修飾的AAV衣殼蛋白：

(a)其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K490、K527、K549或K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成；

(b)其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K532位置上的替代的精氨酸(R)氨基酸殘基組成；

(c)其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K544和K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成；或

(d)其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：8的野生型AAV8衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K547或K569位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成；并且

其中包含所述經修飾的AAV衣殼蛋白的載體的轉導效率高于對應的未經修飾的野生型AAV載體。

2.根據權利要求1所述的經修飾的AAV衣殼蛋白，其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K490、K527、K549或K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成。

3.根據權利要求1所述的經修飾的AAV衣殼蛋白，其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：8的野生型AAV8衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K547或K569位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成。

4.根據權利要求1所述的經修飾的AAV衣殼蛋白，其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K544和K556位置上的替代的谷氨酸(E)氨基酸殘基組成。

5.根據權利要求1所述的經修飾的AAV衣殼蛋白，其中所述經修飾的AAV衣殼蛋白由氨基酸序列為SEQ ID NO：2的野生型AAV2衣殼蛋白修飾而得，其中所述修飾由K532位置上的替代的精氨酸(R)氨基酸殘基組成。

6.一種分離的核酸分子，其編碼根據前述權利要求中任一項所述的經修飾的AAV衣殼蛋白。

7.一種AAV載體，其包含權利要求1至5中任一項所述的蛋白質，并且其包含編碼目的基因的重組核酸。

8.根據權利要求7所述的AAV載體，其中所述AAV載體是重組腺相關病毒顆?；蚋腥拘詒AAV病毒體。

9.一種組合物，其包含(a)根據權利要求1至5中任一項所述的經修飾的AAV衣殼蛋白、根據權利要求6所述的分離的核酸分子或根據權利要求7或8所述的AAV載體；以及(b)可藥用緩沖劑、稀釋劑或載劑。

10.根據權利要求9所述的組合物，其包含在用于診斷、預防、治療或改善哺乳動物疾病或病癥的一種或更多種癥狀的藥盒中。

11.根據權利要求9或10所述的組合物，其用于診斷或治療哺乳動物中的以下疾病，或者用于治療、預防或改善哺乳動物中以下疾病的一種或更多種癥狀：癌癥、糖尿病、自身免疫性疾病、腎病、心血管疾病、胰腺疾病、腸疾病、肝病、神經系統疾病、中風、局部缺血、進食障礙、α₁-抗胰蛋白酶(AAT)缺乏癥、骨骼疾病、創傷或肺病。

12.根據權利要求9至11中任一項所述的組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于診斷、治療、預防或改善哺乳動物中之疾病或病癥的一種或更多種癥狀。

13.含有有效量的根據權利要求7或8所述之AAV載體的組合物在制備用于轉導哺乳動物細胞群的試劑中的用途。