[發(fā)明專利]作為血清和組織生化標(biāo)志物的BAG3

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380032196.6
• 申請(qǐng)日: 2013-06-11
• 公開（公告）號(hào): CN104619861A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 瑪麗亞·卡特里納·圖爾科
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 比奧尤尼沃薩有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C07K16/18;G01N33/68
• 代理公司: 北京安信方達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11262
• 代理人: 王思琪;鄭霞

說明

本發(fā)明涉及用作病理狀態(tài)的診斷中的生化標(biāo)志物的BAG3RNA或其片段。

現(xiàn)有技術(shù)

BAG3(RefSeq：NP_004272；基因ID?9531)為74kDa的細(xì)胞質(zhì)蛋白，特別是集中在粗糙型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。BAG3蛋白屬于通過稱為BAG域的結(jié)構(gòu)域(110-124個(gè)氨基酸)與熱激蛋白HSP70的ATPase域相互作用的共分子伴侶(co-chaperones)家族。除了BAG域，BAG3包括WW域以及可介導(dǎo)與其它蛋白結(jié)合的富含脯氨酸的重復(fù)(PXXP)。此外，兩個(gè)保守的IPV(Ile-Pro-Val)基序位于WW和PXXP區(qū)域之間，并介導(dǎo)BAG3結(jié)合到分子伴侶HspB家族的成員HspB8。因此，由于它的多結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)的銜接性質(zhì)，BAG3可與不同的伴侶蛋白相互作用。bag3基因表達(dá)在包括肌細(xì)胞的少數(shù)正常的細(xì)胞類型中和數(shù)個(gè)原發(fā)瘤或腫瘤細(xì)胞系中是組成性的。此外，它可被各種應(yīng)激源誘導(dǎo)：事實(shí)上應(yīng)激的刺激物激活熱激轉(zhuǎn)錄因子(HSF)1，HSF1負(fù)責(zé)應(yīng)激激活的基因包括bag3的表達(dá)(Rosati?A,Graziano?V,De?Laurenzi?V,Pascale?M,Turco?MC.BAG3:a?multifaceted?protein?that?regulates?major?cell?pathways.Cell?Death?Dis.2011；2:e141)。證據(jù)表明，BAG3通過根據(jù)細(xì)胞的環(huán)境以依賴或不依賴Hsp70的方式調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)例如IKKγ、Bax或BRAF的水平或定位，具有維持細(xì)胞存活的功能。

BAG3蛋白質(zhì)表現(xiàn)為在心肌成肌細(xì)胞分化期間表達(dá)，并且維持成肌素的表達(dá)。這些發(fā)現(xiàn)表明BAG3參與心臟的后期發(fā)育(De?Marco?M，Turco?MC，Rosati?A，BAG3protein?is?induced?during?cardiomyoblast?differentiation?and?modulates?myogenin?expression.Cell?Cycle.2011；10:850-852)。此外，在心肌細(xì)胞中，BAG3已經(jīng)顯示位于Z-盤，并且與肌動(dòng)蛋白加帽蛋白CapZβ1相互作用，穩(wěn)定肌原纖維結(jié)構(gòu)，并且在機(jī)械應(yīng)激過程中可能保持肌纖維的完整性。BAG3突變可損害Z-盤的組裝，并提高對(duì)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的敏感性。與BAG3在心肌細(xì)胞并且通常在肌細(xì)胞中的存活和肌纖維的完整性中的作用一致，bag3基因的突變已經(jīng)與一些形式的肌纖維肌病和擴(kuò)張型心肌病相關(guān)聯(lián)。

到目前為止，已經(jīng)檢測(cè)到了細(xì)胞質(zhì)BAG3和可溶的串行形式的BAG3二者，并且發(fā)現(xiàn)它們與不同的病理，以及更廣泛地與細(xì)胞存活相關(guān)聯(lián)。

對(duì)允許快速鑒定這樣的病理，而不具有以意外的特殊方式以及敏感的方式與創(chuàng)傷性診斷相關(guān)聯(lián)的缺點(diǎn)，和/或可允許早期檢測(cè)病理，監(jiān)測(cè)治療的效果，預(yù)測(cè)并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)行信息追蹤的生物學(xué)標(biāo)志物的鑒定日益感到需求及重要性。

發(fā)明概述

本發(fā)明涉及用作病理狀態(tài)的診斷中的生化標(biāo)志物的BAG-3RNA或其片段。

優(yōu)選地，所述BAG3RNA為BAG3mRNA。

根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式，所述診斷是體外的(in?vitro)或離體的(ex?vivo)。

本發(fā)明的另一方面為，所述診斷的接受者為哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人類。

如在本發(fā)明的詳細(xì)說明中進(jìn)一步描述的，本發(fā)明的BAG-3RNA或其片段的用途具有對(duì)選自由心臟病，癌癥，糖尿病，皮膚、神經(jīng)、骨、血管和結(jié)締組織的炎癥和炎癥相關(guān)的疾病組成的組的病理狀態(tài)特異性的優(yōu)點(diǎn)。

根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方式，所述心臟病選自：心絞痛、梗塞前心絞痛、心肌梗塞、心力衰竭、局部缺血(ischemia)、急性冠心病(acute?coronary?disease)、急性心力衰竭、慢性心力衰竭和醫(yī)源性心臟病。

根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式，所述癌癥選自：胰腺癌、膀胱癌和前列腺癌。

本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式為用于在生物樣品中檢測(cè)和/或定量BAG3基因表達(dá)的試劑盒，特征在于包括由bag3核苷酸序列(SEQ?ID?NO?18)包含的一對(duì)單鏈寡核苷酸引物。

優(yōu)選地，所述試劑盒包括一對(duì)引物，所述一對(duì)引物選自具有包含在bag3核苷酸序列的核苷酸1至核苷酸360、核苷酸466至核苷酸1570或核苷酸1801至核苷酸2533的區(qū)域之一中的核苷酸序列的引物。