[發明專利]使用共同輕鏈制備完全人雙特異性抗體的方法

有效

• 申請號: 201380030014.1
• 申請日: 2013-06-05
• 公開（公告）號: CN104582476B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發明（設計）人: R·巴布;J·麥克維爾特;L·麥克唐納;S·史蒂文斯;S·戴維斯;D·R·巴克勒;K·A·霍西阿瓦;A·J·墨菲
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/027;C07K16/00;C07K16/40
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 李程達

1.一種制備雙特異性抗原結合蛋白的方法，包括：

獲得來源于分離自同一或不同的小鼠的兩種不同的B細胞的兩種不同的人重鏈可變區基因序列，所述小鼠表達單一人輕鏈可變結構域和多個人重鏈可變結構域，和

制備雙特異性抗原結合蛋白，其具有包含被所述兩種人重鏈可變區基因序列編碼的氨基酸序列的兩種人重鏈和包含所述人輕鏈可變結構域的人輕鏈。

2.權利要求1所述的方法，其中在所述同一或不同的小鼠中表達的所述單一人輕鏈可變結構域由來源于單一的經重排的人種系V區段和單一的經重排的人種系J區段的核苷酸序列編碼。

3.權利要求2所述的方法，其中所述單一的經重排的人種系V區段是重排的人Vк1-39或重排的人Vκ3-20基因區段。

4.權利要求2所述的方法，其中所述單一的經重排的人種系J區段是重排的人Jκ5或重排的人Jк1基因區段。

5.權利要求1所述的方法，其中所述同一或不同的小鼠包含重鏈基因座，所述重鏈基因座含有可操作地連接至一個或多個非人重鏈恒定區基因的一個或多個未經重排的人V_H基因區段、一個或多個未經重排的人D_H基因區段和一個或多個未經重排的人J_H基因區段。

6.權利要求5所述的方法，其中所述重鏈基因座包含可操作地連接至一個或多個小鼠重鏈恒定區基因的80個未經重排的人V_H基因區段、27個未經重排的人D_H基因區段和6個未經重排的人J_H基因區段。

7.權利要求5所述的方法，其中一個或多個人V_H基因區段包含人V_H1-2、V_H1-8、V_H1-24、V_H1-69、V_H2-5、V_H3-7、V_H3-9、V_H3-11、V_H3-13、V_H3-15、V_H3-20、V_H3-23、V_H3-30、V_H3-33、V_H3-48、V_H3-53、V_H4-31、V_H4-39、V_H4-59、V_H5-51、V_H6-1或其組合。

8.權利要求1所述的方法，其中所述同一或不同的小鼠不包含能夠重排以形成編碼輕鏈可變結構域的基因的內源輕鏈可變基因區段。

9.權利要求1所述的方法，其中所述兩種人重鏈可變區基因序列的每一種包含來源于相同或不同的V_H區段的序列，并且其中所述V_H區段選自V_H1-2、V_H1-8、V_H1-24、V_H1-69、V_H2-5、V_H3-7、V_H3-9、V_H3-11、V_H3-13、V_H3-15、V_H3-20、V_H3-23、V_H3-30、V_H3-33、V_H3-48、V_H3-53、V_H4-31、V_H4-39、V_H4-59、V_H5-51和V_H6-1。

10.權利要求1所述的方法，其中所述兩種人重鏈結合：

兩種不同的抗原，或

同一抗原的兩種不同表位。