[發明專利]用于誘導和擴增源自外周血單個核細胞的自然殺傷細胞的方法有效
| 申請號: | 201380028253.3 | 申請日: | 2013-05-07 |
| 公開(公告)號: | CN104321425B | 公開(公告)日: | 2018-08-10 |
| 發明(設計)人: | 李景美;林善雅;余嘉誠 | 申請(專利權)人: | 株式會社NKMAX |
| 主分類號: | C12N5/0783 | 分類號: | C12N5/0783;C12N13/00;A61K35/17 |
| 代理公司: | 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人: | 黎艷;胡杰 |
| 地址: | 韓國*** | 國省代碼: | 韓國;KR |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 誘導 擴增 源自 外周血 單個 細胞 自然 殺傷 方法 | ||
1.用于誘導和擴增源自外周血單個核細胞的自然殺傷(NK)細胞的方法,其中該方法包括:在存在細胞因子的條件下,將作為飼養細胞的經輻射的Jurkat細胞和經輻射的、由EB病毒轉化的連續性淋巴細胞株(EBV-LCL)細胞與外周血單個核細胞進行共培養。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述外周血單個核細胞是從正常人、有患癌風險的患者或癌癥患者中獲得的。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述經輻射的Jurkat細胞和經輻射的EBV-LCL細胞是分別通過100~500Gy的輻射處理而獲得的。
4.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述細胞因子為選自IL-2、IL-15、IL-21、Flt3-L、SCF、IL-7、IL-12和IL18中的一種或多種。
5.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述細胞因子的使用濃度為50~1,000U/ml。
6.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述共培養進行7~30天。
7.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,在所述共培養中,所述外周血單個核細胞與飼養細胞的混合比為1:5~2:1。
8.根據權利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述方法進一步包括:在后續培養的第1天至第15天,加入所述經輻射的Jurkat細胞、經輻射的EBV-LCL細胞和所述細胞因子,以在誘導及增殖源自外周血單個核細胞的NK細胞后維持NK細胞。
9.一種預防和治療癌癥的藥物組合物,該組合物包含根據權利要求1~8中任一項所述的方法中獲得的源自外周血單個核細胞的自然殺傷細胞。
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